[发明专利]稳定的抗乙肝病毒(HBV)抗体配制剂

说明书

发明领域

本发明关注用于治疗或预防乙型肝炎感染的抗HBsAg人单克隆抗体的液体配制剂。

发明背景

乙肝病毒(HBV)感染是全球公共健康问题，其死亡率使之位于前10名主要传染性杀手之中。世界卫生组织估计全世界有4亿人携带该病毒。估计急性HBV疾病每年引起600,000例死亡，慢性疾病的并发症包括HBV诱发的肝硬化和肝细胞癌，每年造成约400,000例死亡(El-Serag HB and Mason AC.NEngl J Med.1999；340(10)：745-750)。

许多感染了乙肝病毒的患者不能解决感染，并形成慢性HBV，可引起肝功能衰退，包括硬化和肝代偿失调，随后需要移植。尽管在移植前切除了受到感染的肝脏，有些循环中的病毒仍然保留在血清中，而且认为其它机体隔室中还存在其它储库。因此，这些患者移植的肝脏有再次感染HBV的高风险。

HBV感染的预防可通过主动或被动免疫来实现。使用重组HBV疫苗的主动免疫可预防HBV感染，如果在暴露前给予的话。自非传染性病毒亚基制备的这些疫苗已经显示出是安全且有效的，而且赋予长期免疫力。

使用乙肝特异性抗体的被动免疫，在暴露后不久给予，可降低疾病的发生率或严重程度。乙肝免疫球蛋白(HBIG)是血浆衍生的、针对乙肝表面抗原的抗体(anti-HBs)的多克隆制剂。这些抗体结合并中和病毒表面上的肝炎表面抗原，从而预防感染。

使用HBIG的被动免疫在病毒滴度较低时给予且抗体达到过量时是最有效的。为此，HBIG已经证明对预防新的感染是有效的。在肝移植后用于预防再次感染时，它也表现出是部分有效的，在这种情况下病毒载量随受感染器官的切除而降低。在手术前具有较低病毒滴度的患者中，它已经证明是尤其有效的。

目前，有三种抗病毒产品可用于治疗慢性乙肝：干扰素2b(IntronA，Schering)、拉米夫定(lamivudine)(Epivir HBV，GlaxoSmithKline)和/或阿德福韦二匹伏酯(adefovir dipivoxil)(Hepsera^TM，Gilead Sciences)。然而，没有哪种疗法能够治愈所有患者中的慢性HBV感染。HBIG尚未证明在治疗产生持久水平病毒的慢性乙肝患者中是有效的，而且不可能在不频繁施用抗体的情况下产生过量的抗体。

涉及慢性病毒性肝炎的末期肝病是全世界原位肝移植(OLT)的主要适应症。术语“原位”(orthotopic)意味着切除患病器官并将新的同种异体移植物植入右上腹部中的正常或通常位置。由于HBV感染导致的硬化和器官衰竭而进行的OLT占到所有成人移植的5％到10％。

保护移植的肝脏免于复发性HBV感染对于保持移植物的功能是至关重要的。终生HBV预防性治疗可能是必需的，因为病毒在切除受感染的肝脏后保留在数个其它机体隔室(脾脏、淋巴结、肾脏、皮肤、胃肠道、性腺、神经节和脑)中。患者在移植后发生免疫抑制时，迅速复发肝脏的乙肝感染，导致进行性疾病、移植物衰竭和死亡。在移植时具有活动性HBV复制体征(HBeAg和/或高水平的HBV DNA)的患者风险增高。重复移植后，疾病复发的发生甚至更快(Rosen HR and Martin P.Infectious Disease Clinics of NorthAmerica.September 2002；14(3)：761-786)。

总之，血浆衍生的多克隆抗体的使用是有限的，因为这些制剂活性易变，可用性有限，且存在传播传染因子的潜在危险。

相反，单克隆抗体(mAb)可以一致地生产，而且没有与血浆衍生产品有关的传染风险。

在先前的研究中，针对乙肝表面抗原(HBsAg)的不同表位开发了两种完全人的单克隆抗体(PCT/IL97/00184和PCT/IL97/00183)。将这些抗体的混合物单次施用到HBV慢性携带者黑猩猩中导致HBsAg水平立即降低，随后在几天内重现初始水平(Eren et al.，2000 Hepatology 32，588-596)。

使用这两种单克隆抗体(称作HBV-AB^XTL，现在称作HEPEX B^TM)进行了1期临床研究。在研究的A部分，患者接受单次静脉内(IV)输注抗体，而在B部分，患者接受4次每周一次的输注。抗体混合物在降低HBsAg和HBV DNA水平方面是有效的。