[发明专利]一种白芍药材的提取分离方法

权利要求书

1.一种白芍提取、分离方法，包括如下步骤：

(1)提取工艺：称取白芍药材，将其粉碎后过筛，然后加入5～12倍量体积比为7∶3的乙酸乙酯和乙醇，加热回流0.5～3小时，提取1～3次，合并滤液得提取液fr.1；在药渣中加入5～12倍量70％乙醇，加热回流0.5～3小时，提取1～3次，合并滤液得提取液fr.2；在药渣中最后加入水，加热回流0.5～3小时，提取1～3次，合并滤液得提取液fr.3；

(2)分离工艺：将提取液fr.1浓缩成浸膏后，用硅胶拌样，采用正相硅胶柱对其进行分离，首先用体积比为50∶1的石油醚和乙酸乙酯作为流动相，得洗脱液fr.4，然后改换体积比为7∶3的氯仿和甲醇作为流动相，得洗脱液f r.5，最后用甲醇作为流动相，得洗脱液fr.6；将提取液fr.2浓缩成浸膏后，用2～10％甲醇溶解上样，采用ODS-C18柱对其进行分离，首先用2～10％甲醇作为流动相，得洗脱液fr.7，然后改换40～80％甲醇作为流动相，得洗脱液fr.8，最后用100％甲醇溶液作为流动相，得洗脱液fr.9；

(3)制备分离工艺：用制备液相色谱分离fr.8；色谱柱为制备柱(Zorbax SB-C18；21.2mm×250mm)，流动相为水和乙腈，梯度洗脱，流速为10ml/min，柱温为室温，在相应的时间段收集馏分，获得经过进一步分离的各个组分。

2.如权利要求1所述的白芍提取、分离方法，包括以下步骤：

(1)提取工艺：称取白芍药材，将其粉碎后过筛，然后加入8倍量体积比为7∶3的乙酸乙酯和乙醇，加热回流1小时，提取2次，合并滤液得提取液fr.1；在药渣中加入8倍量70％乙醇，加热回流1小时，提取2次，合并滤液得提取液fr.2；在药渣中最后加入水，加热回流1小时，提取2次，合并滤液得提取液fr.3；

(2)分离工艺：将提取液fr.1浓缩成浸膏后，用硅胶拌样，采用正相硅胶柱对其进行分离，首先用体积比为50∶1的石油醚和乙酸乙酯作为流动相，得洗脱液fr.4，然后改换体积比为7∶3的氯仿和甲醇作为流动相，得洗脱液fr.5，最后用甲醇作为流动相，得洗脱液fr.6；将提取液fr.2浓缩成浸膏，用5％甲醇溶解上样，采用ODS-C18柱对其进行分离，首先用5％甲醇作为流动相，得洗脱液fr.7，然后改换70％甲醇作为流动相，得洗脱液fr.8，最后用100％甲醇溶液作为流动相，得洗脱液fr.9；

(3)制备分离工业：用制备液相色谱分离fr.8；

fr.8的分离条件：色谱柱为制备柱(Zorbax SB-C18；21.2mm×250mm)，采用梯度洗脱，流动相为水(A)和乙腈(B)，流速为10ml/min，柱温为室温，洗脱梯度如下：

0min时，流动相A为85％的水，流动相B为15％的乙腈溶液；

5min时，流动相A为82％的水，流动相B为18％的乙腈溶液；

20min时，流动相A为70％的水，流动相B为30％的乙腈溶液；

40min时，流动相A为65％的水，流动相B为35％的乙腈溶液；

45min时，流动相A为5％的水，流动相B为95％的乙腈溶液；

fr.8分离结果：由制备液相色谱分离得到的组分及相应的收集时间如下：

组分fr.81，收集时间4.0-14.0min；

组分fr.82，收集时间14.0-18.1min；

组分fr.83，收集时间18.1-20.0min；

组分fr.84，收集时间20.0-25.5min；

组分fr.85，收集时间25.5-28.9min；

组分fr.86，收集时间28.9-31.3min；

组分fr.87，收集时间31.3-38.0min；

组分fr.88，收集时间38.0-45.0min。

3.如权利要求2所述的白芍提取、分离方法，其特征在于：

组分fr.82中主要化合物为Albiflorin；

组分fr.83中主要化合物为Paeoniflorin；

组分fr.84中主要化合物为1，2，3，4，6-Pentagalloylglucose；

组分fr.85中主要化合物为Digalloyl-1，2，3，4-tetra-O-galloyl-D-glucopyranose，Galloyl-Paeoniflorin；

组分fr.86中主要化合物为Methyl gallate，Albiflorin，

1，2，3，4，6-Pentagalloylglucose；

组分fr.87中主要化合物为Methyl gallate，1，2，3，4，6-Pentagalloylglucose；

组分fr.88中主要化合物为1，2，3，4，6-Pentagalloylglucose，Paeonidaninol a orb。