[发明专利]人促造血细胞增殖的细胞因子及其制备方法和用途无效
| 申请号： | 200610013828.6 | 申请日： | 2006-05-23 |
| 公开（公告）号： | CN101077887A | 公开（公告）日： | 2007-11-28 |
| 发明（设计）人： | 韩忠朝;王黎芳;韩之波 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院血液学研究所;中国医学科学院血液学研究所泰达生命科学技术研究中心 |
| 主分类号： | C07K14/52 | 分类号： | C07K14/52;C12N15/12;C12N15/63;A61K38/19;A61K39/00;A61P35/02 |
| 代理公司： | 天津才智专利商标代理有限公司 | 代理人： | 王晓红 |
| 地址： | 300020*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 造血 细胞 增殖 细胞因子 及其 制备 方法 用途 | ||
1、一种人促造血细胞增殖的细胞因子，其特征在于，所述人促造血细胞增殖的细胞因子pNH由SEQ ID NO.2所列氨基酸序列的蛋白质组成。
2、编码pNH的cDNA分子，其特征在于，由SEQ ID NO.1所列核苷酸序列的全部或片段。
3、一种权利要求2所述编码pNH的cDNA的克隆方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)根据SEQ ID NO.2所列氨基酸序列，用已知的遗传密码推测出与这些氨基酸相应的核苷酸序列；
2)设计特异性引物，以pfu DNA聚合酶进行PCR扩增，所述特异性引物为：扩增pNH的片段的上游引物为5’-GCCATGGATGCCACCTGCAACTGTGAT-3’，下游引物为5’-gCCTCgAgAGTTGTGACCTTGAAGTCACCAT-3’。
3)用特异性cDNA扩增产物作为探针，从人cDNA文库中筛选出pNH的cDNA，所述特异性cDNA扩增产物为编码1)所述的pNH氨基酸序列的核苷酸。
4、根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述人cDNA文库为人胚胎肝细胞cDNA文库。
5、一种表达pNH的质粒，其特征在于，含权利要求3方法所得到的cDNA。
6、根据权利要求5所述表达pNH的质粒，其特征在于，所述质粒从pET32c(+)或pET22b(+)构成。
7、一种SEQ ID NO.2所列氨基酸序列的pNH的纯化方法，其特征在于，包括以Ni2+螯合层析柱纯化融合蛋白，肠激酶酶切融合蛋白，ResourceQ阴离子交换层析纯化目的蛋白，或以Ni2+螯合层析柱纯化分泌型蛋白，Superdex75凝胶过滤纯化目的蛋白。
8、一种药物组合物，其特征在于，包含SEQ ID NO.2所列氨基酸序列的pNH蛋白。
9、一种用于研究造血细胞增殖pNH的试剂，其特征在于，包含SEQ ID NO.2所列氨基酸序列的pNH蛋白。
10、用于制备抗pNH的单克隆或多克隆抗体的抗原，其特征在于，包含SEQ ID NO.2所列氨基酸序列的pNH蛋白。
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