[发明专利]检测黑麦草腥黑穗病菌的引物、探针及方法无效
申请号: | 200610025685.0 | 申请日: | 2006-04-13 |
公开(公告)号: | CN101054600A | 公开(公告)日: | 2007-10-17 |
发明(设计)人: | 易建平;周国梁;印丽萍 | 申请(专利权)人: | 上海出入境检验检疫局 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 上海浦一知识产权代理有限公司 | 代理人: | 丁纪铁 |
地址: | 200135上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 麦草 腥黑穗病 引物 探针 方法 | ||
1.用于检测黑麦草腥黑穗病菌的引物,其特征在于,它包含15个或更多个连续核苷酸的一条链或其互补链,其中一个或多个核苷酸是SEQ IDNO.1序列的32、57、258、277中任何位点的核苷酸。
2.如权利要求1所述的引物,其特征在于,它含有:
5’-TTCTCTTTTATCCCAACACCAAACT-3’或其互补链。
3.如权利要求1所述的引物,其特征在于,它含有:
5’-CTTATCGCATTTCGCTGCG-3’或其互补链。
4.用于检测黑麦草腥黑穗病菌的探针,其特征在于,它包含15个或更多个连续核苷酸的一条链或其互补链,其中一个或多个核苷酸是SEQ IDNO.1序列的67、78、82中任何位点的核苷酸。
5.如权利要求4所述的探针,其特征在于,它含有:
(FAM)-CGGAAGGAACAAGGC-(MGB)或其互补链。
6.一种检测黑麦草腥黑穗病菌的方法,其特征在于,它包括如下步骤:
(1)提取冬孢子DNA;
(2)以步骤(1)中提取的DNA为模板,用SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6序列的引物进行第一轮PCR扩增;
(3)以步骤(2)的PCR产物为模板,用权利要求1所述的引物进行实时荧光PCR扩增;
(4)分析步骤(3)的实验结果。
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,步骤(3)中所述的引物为具有SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3序列的一对引物。
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