[发明专利]重组蛋白AMACR及其在制备前列腺癌诊断标记物上的应用

权利要求书

1.重组蛋白AMACR，其特征在于包含序列表中SEQ ID NO.1所示氨基酸序列。

2.重组蛋白AMACR的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)提取雄性激素依赖型人细胞株LNCaP中所含总RNA，以其作为模板进行

RT-PCR扩增，获得序列表中SEQ ID NO.2所示的AMACR全基因序列；

2)构建增幅用重组质粒pDrive-AMACR；

3)构建表达用重组质粒pRSET-B-AMACR；

4)转化重组质粒pRSET-B-AMACR至宿主细胞中，并在宿主细胞中表达，获得重组蛋白AMACR。

3.如权利要求2所述的制备方法，其中还包括纯化步骤。

4.如权利要求3所述的制备方法，其中所述的纯化步骤采用Ni-NTA树脂。

5.抗AMACR抗体，其特征在于以重组蛋白AMACR为抗原，经免疫动物后所得的抗体。

6.抗AMACR抗体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)以重组蛋白AMACR为抗原，多次免疫动物；

2)采集免疫后全血，分离得血清，获得抗AMACR抗体。

7.如权利要求6所述的制备方法，其中所述抗原还包括免疫佐剂。

8.如权利要求6所述的制备方法，其中还包括采用rProtein A Sepharose Fast Flow树脂进行纯化的步骤。

9.权利要求1所述重组蛋白AMACR在制备前列腺癌诊断标记物上的应用。

10.前列腺癌的体外检测方法，其特征在于包括以下步骤：

1)前列腺样品的固定、包埋及切片；

2)脱蜡和水化；

3)用抗AMACR抗体进行免疫组织化学染色；

4)脱水、透明、封片及镜检。