[发明专利]鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗的制备方法

权利要求书

1.一种鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗的制备方法，其特征在于：新城疫与传染性支气管炎二联灭活疫苗组和，采用NDVLaSota株病毒液，含重量比：10～22％；IBVM41株病毒液，含重量比：10～22％；分别浓缩、灭活；再加入佐剂白油，免疫助剂吐温、司本、硬脂酸铝制成联苗。

2.根据权利要求1所述的鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗的制备方法，其特征在于：生产用毒种的制备，NDV La Sota株和IBV M₄₁株毒种分别适当稀释，分别接种SPF鸡胚，孵育，收获；制苗用病毒液的制备；NDV La Sota株和IBV M₄₁株毒种分别适当稀释，分别接种易感鸡胚，孵育；收活毒种：分别浓缩、灭活；取制苗用NDV La Sota毒株液15％和IBV M₄₁毒株液15％，加吐温-80制成水相，用白油、司本-80、硬脂酸铝制成油相；水相与油相之比为1∶1.5一起乳化；分装，帖签，装箱，入库。

3.根据权利要求1所述的鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗的制备方法，其特征在于：生产用毒种的制备：NDV La Sota株和IBV M₄₁株毒种分别适当稀释，分别接种SPF鸡胚，孵育，收获；制苗用病毒液的制备：NDV La Sota株和IBV M₄₁株毒种分别适当稀释，分别接种易感鸡胚，孵育；收活毒种：分别浓缩、灭活；取制苗用NDV La Sota毒株液16％和IBV M₄₁毒株液16％，加吐温-80制成水相，用白油、司本-80、硬脂酸铝制成油相；水相与油相之比为1∶2一起乳化；分装，帖签，装箱，入库。

4.根据权利要求1所述的鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗的制备方法，其特征在于：生产用毒种的制备：NDV La Sota株和IBV M₄₁株毒种分别适当稀释，分别接种SPF鸡胚，孵育，收获；制苗用病毒液的制备：NDV La Sota株和IBV M₄₁株毒种分别适当稀释，分别接种易感鸡胚，孵育；收活毒种，分别浓缩、灭活；取制苗用NDV La Sota毒株液17％和IBV M₄₁毒株液17％，加吐温-80制成水相，用白油、司本-80、硬脂酸铝制成油相；水相与油相之比为1∶2.5一起乳化；分装，帖签，装箱，入库。

5.根据权利要求1所述的鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗的制备方法，其特征在于：生产用毒种的制备：NDV La Sota株和IBV M₄₁株毒种分别适当稀释，同时接种SPF鸡胚，孵育，收获；制苗用病毒液的制备：NDV La Sota株和IBV M₄₁株毒种分别适当稀释，同时接种易感鸡胚，孵育；收获毒种，灭活，加吐温-80制成水相，用白油、司本-80、硬脂酸铝制成油相∶水相与油相之比为1∶2一起乳化；分装，帖签，装箱，入库。

6.根据权利要求1所述的鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗的制备方法，其特征在于：具体浓缩工艺流程：将三种制苗用病毒胚液从冰箱取出，融化后分别在无菌条件下用灭菌的装有四层纱布和一层100目铜网的无菌漏斗滤过，除去鸡胚液残渣和其他粗颗粒杂质；然后将粗滤的三种病毒液分别倒入浓缩装置的储缸内，开启一级滤柱的浓缩阀门，关闭二级超滤柱的阀门，开动电机，使病毒液通过一级滤柱；然后关闭一级滤柱阀门，开启二级超滤柱阀门，使病毒液反复通过二级滤柱，截留病毒并排除水分，直至浓缩后的病毒液达到设计的浓缩终点为止。

7.根据权利要求1所述的鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗的制备方法，其特征在于：灭活是指破坏病菌微生物的生物学活性、繁殖能力及致病性，DNV La sota病毒液采用0.05～0.15％甲醛溶液，35～38℃灭活12～17小时，IBVM₄₁病毒液采用2-8℃低温灭活120-145小时，可使病毒彻底灭活，而且不影响其免疫原性。