[发明专利]一种提取荷叶黄酮的工艺

说明书

技术领域

本发明涉及一种从天然植物具体是从荷叶中提取总黄酮的制备工艺，特别是用沉淀、超滤、大孔吸附树脂技术提取荷叶总黄酮，分步洗脱收集不同类型的荷叶黄酮的制备方法，并适用于规模化生产用。

背景技术

荷叶药用基础研究证实了荷叶具有一定的减肥降脂的作用，荷叶的浸剂和煎剂能直接扩散血管，引起中度降压，荷叶有降压作用，可辅助性治疗继发性肥胖症。荷叶中含有黄酮化合物、生物碱、萜类化合物等生物活性成分。这些成分具有相当强的抗氧化作用，能清除生物体内过剩的自由基、防止组织体内脂质过氧化、提高人体机体的免疫力等，是首选的治疗心脑血管疾病的天然药物。据报道，黄酮类化合物对于改善心、脑血液循环，调节血脂，降低血清胆固醇等有很好的疗效。

目前，荷叶黄酮生产工艺主要有溶剂萃取法、碱提酸沉法、超临界CO2萃取法和树脂吸附法，其中溶剂萃取法成本高，碱提酸沉法只能提取部分荷叶黄酮，超临界萃取法设备投入大。目前荷叶黄酮还没有投入工业化生产，其技术仍处于研究探索阶段。现有关于荷叶黄酮树脂提取研究及专利技术的缺陷是，用大孔树脂吸附前未进行萃取去除脂溶性杂质，更未去除大分子杂质，上柱后，对树脂污染大，吸附容量很低，使得树脂吸附不适宜工业化生产中应用，得到的产品纯度也欠佳；其次，解吸并没有考虑荷叶黄酮是一类结构不同、极性不等的化合物，没有对荷叶黄酮进行分步洗脱分离，分离去杂不够具体。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用沉淀—萃取—超滤—大孔吸附树脂吸附联用技术精制荷叶黄酮的方法，浓缩脱醇后沉淀去除了水不溶性杂质，石油醚萃取脱除脂溶性杂质，超滤膜去除水溶性大分子杂质，大孔吸附树脂选择性吸附荷叶黄酮，分步洗脱收集不同类型的高纯度黄酮的制备方法，为医药行业使用提供规模化生产的提取荷叶黄酮的工艺。

本发明的技术方案是按下列步骤顺序进行：

1)将洁净鲜荷叶干燥、粉碎，制得荷叶粉末；

2)将荷叶粉末与50～70％乙醇，按重量比1∶25～30混合置入浸提釜中，升温至70～80℃，静置40～60分钟，制得荷叶黄酮浸提液；

3)将浸提液置入真空浓缩釜，脱除浸提液中的乙醇，至釜内物料质量为荷叶质量的9～11倍时，停止脱除乙醇，得浓缩浸提液，再过滤去除浓缩浸提液中的沉淀物；

4)将过滤后的浓缩浸提液置入萃取釜，加入石油醚，搅拌、静置30分钟，萃取去除脂溶性杂质，得萃余液；

5)调节萃余液的pH值为8.0～10，过滤去除碱不溶性杂质，调节pH值至原有水平，加入所用荷叶质量的30～50倍的水进行稀释，再用MWCO(膜的截留分子量)在5～10万超滤膜进行超滤，去除水溶性大分子杂质，超滤时为常温，压力为0.10～0.20MPa，直至料液剩15～30％时，加水透析至少两次，制得黄酮超滤处理液；

6)采用吸附容量为196mg黄酮/mL大孔树脂，将其湿法装入树脂柱，水洗涤平衡后，将超滤处理液缓慢通入树脂柱，上柱流速为4～6BV/h，检测漏出液黄酮浓度达到初始浓度的10～20％时停止上柱；

7)对吸附饱和的树脂柱，采用1.0～2.0倍树脂体积的pH值为3～5、温度为10～15℃的水洗涤，有效去除杂质；然后用1.0～2.0倍树脂体积的10％左右的乙醇水溶液洗脱树脂吸附的黄酮甙类化合物，得纯度＞50％的黄酮甙类化合物；接着用1.0～2.0倍树脂体积的20～40％乙醇水溶液洗脱树脂吸附的中等极性的黄酮类黄酮化合物，得纯度＞85％的中等极性的黄酮类黄酮化合物；再用1.0～2.0倍树脂体积的45～50％的乙醇水溶液洗脱，该洗液弃用；最后，用1.0～2.0倍树脂体积的60％左右的乙醇水溶液洗脱树脂中吸附的极性弱的黄酮类化合物，得纯度＞50％的极性弱的黄酮类化合物；

8)将上步骤分离得到的三种荷叶黄酮类化合物解吸液，分别进行真空浓缩，回收乙醇，得三种浸膏，再将三种浸膏分别进行真空干燥、粉碎，得三种荷叶黄酮精细粉。

鲜荷叶的采取原则为莲藕生长成熟期、色泽鲜艳、无斑点的荷叶。

往步骤2)制得的滤渣中以重量比1∶15～10加入50～70％乙醇，按步骤2)的温度、时间再提取一次，并将该提取液加入步骤2)制得的提取液。

往步骤4)的浓缩浸提液中加入2/3～1倍体积的沸程为60℃的石油醚，萃取两次，去除脂溶性杂质。