[发明专利]埃博霉素B的制备方法和用途

权利要求书

1.一种大规模发酵生产埃博霉素B的方法，其特征在于包括如下步骤：

(a)种子液在发酵罐发酵培养12～96小时，加入1％～10％吸附剂，吸附代谢产物；

(b)发酵100-150小时后停止发酵，稠布过滤发酵液收获吸附剂；

(c)吸附剂用异丙醇提取后减压浓缩或用水浸润，再用乙酸乙脂萃取旋转蒸发至干，得埃博霉素B粗提物；

(d)提取物用低级醇溶解后，经过常压柱层析用低级醇与氯代烷的混合液或单用低级醇洗脱；

(e)HPLC检测并合并含埃博霉素B的馏份，减压浓缩到一定体积后，通过液相色谱进一步纯化，得到纯化的埃博霉素B。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤a中发酵所用培养基包括淀粉1～35g/L，糖1～10g/L，黄豆粉2～30g/L，酵母提取物2～30g/L。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于培养基中糖选自葡萄糖、果糖或蔗糖。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤a中吸附剂选自弱极性大孔吸附树脂。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤b的发酵过程中可补加葡萄糖或复合料。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤c中，用异丙醇提取时与吸附剂的体积/重量比为2～3∶1，分次提取2～3次，浓缩至原体积的1/10～1/5。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤d中，柱层析填料选自硅胶或葡聚糖凝胶LH-20，低级醇选自甲醇或乙醇，氯代烷选自二氯甲烷或氯仿。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤e中液相色谱为反相C-18制备型液相色谱。

9.一种埃博霉素B的药物组合物，其特征在于含有埃博霉素B和聚乙二醇，剂型为注射剂、冻干粉剂或其他制剂。

10.埃博霉素B在制备治疗格列卫耐药的慢性髓细胞性白血病药物中的用途。