[发明专利]包含疟原虫MSP－1的C－末端片段的重组蛋白

权利要求书

1.一种重组蛋白，其必要组成性多肽序列为：

·感染哺乳动物尤其是人的非间日疟原虫的疟原虫属类寄生虫的裂殖子形式的表面蛋白1(MSP-1蛋白)的19kDa(p19)C-末端片段的序列，该C-末端片段通常在感染周期中其进入人红细胞的穿透阶段末期仍然锚定在寄生虫表面；

·或仍能诱导可在体内抑制由于相应的寄生虫导致的寄生虫血症的免疫应答的该片段的一部分的序列；

·或能诱导与由所述p19片段或该片段的所述部分产生的等价的细胞和/或体液免疫应答的肽的序列；和

所述重组蛋白可能进一步包含在还原介质中不稳定的并组成对抗相应疟原虫而形成的人抗血清所识别的大部分表位的构象表位。

2.根据权利要求1的重组蛋白，其特征在于当它为非还原状态或非不可逆还原状态时，它可被抗相应疟原虫或抗同源的疟原虫而形成的人抗血清识别，但当它为不可逆还原状态时，它不能被这些相同的抗血清识别或仅在很小程度上被识别。

3.根据权利要求1或2的蛋白，其特征在于它抑制人抗血清与在相同条件下产生的相应的p42以及p42本身的免疫反应性，而p42仅可部分抑制所述人抗血清对p19的反应性。

4.根据权利要求1-3任一项的重组蛋白，其特征在于它基本上失去了正常位于p33(33kDa N-末端片段)的C-末端多肽序列上游的任何多肽序列，在p42天然裂解之前在相应p42中p33该侧与p19相连，所述p33的最后C-末端多肽序列当存在时包含少于50个氨基酸残基。

5.根据权利要求1-3任一项的重组蛋白，其特征在于它基本上失去了正常位于p33(33kDa N-末端片段)的C-末端多肽序列上游的任何多肽序列，在p42天然裂解之前在相应p42中p33该侧与p19相连，所述p33的最后C-末端多肽序列当存在时包含少于10个氨基酸残基。

6.根据权利要求1-3任一项权利要求的重组蛋白，其特征在于它基本上失去了正常位于p33(33kDa N-末端片段)的C-末端多肽序列上游的任何多肽序列，在p42天然裂解之前在相应p42中p33该侧与p19相连，所述p33的最后C-末端多肽序列当存在时限于保留感染人的疟原虫如恶性疟原虫或间日疟原虫中的相当程度的保守性的序列。

7.根据权利要求1-6任一项的重组蛋白，其特征在于p19片段的所述部分包含通常包含在该p19中的两个EGF区域中的至少一个。

8.根据权利要求1-7任一项的重组蛋白，其特征在于所述p19片段或p19片段的所述部分的分子量为10-25kDa，尤其是10-15kDa。

9.根据权利要求1-8任一项的重组蛋白，其特征在于它还包含使p19片段能锚定在表达所述重组蛋白的宿主细胞上的糖基磷脂酰肌醇(GPI)基团，其中宿主细胞尤其是真核细胞，优选可被杆状病毒感染的昆虫细胞。

10.根据权利要求1-8任一项的重组蛋白，其特征在于它失去了极其疏水的C-末端部分，该C-末端部分参与诱导将所述重组蛋白锚定至表达它的宿主的细胞膜上，其中宿主细胞尤其是真核细胞，优选为可被杆状病毒感染的昆虫细胞。

11.根据权利要求10的重组蛋白，其特征在于它为水溶性的。

12.根据权利要求1-11任一项的重组蛋白，其特征在于它包含恶性疟原虫的MSP-1蛋白的p19序列或相应片段的所述部分。

13.根据权利要求1-12任一项的重组蛋白，其特征在于它包含猴疟原虫的MSP-1蛋白的p19序列或相应片段的所述部分。

14.根据权利要求1-13任一项的重组蛋白的寡聚体。

15.根据权利要求14的寡聚体，其特征在于它包含如权利要求1-13任一项中定义的重组蛋白的所述多肽序列的2-50个单体单位。

16.根据权利要求1-14任一项的重组蛋白，其特征在于它与用于生产疫苗的载体分子结合。