[发明专利]卡巴拉汀对映异构体的高效液相色谱法拆分方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高效液相分析分离方法，尤其是一种卡巴拉汀的对映异构体的分析与分离测定方法。

背景技术

卡巴拉汀是一种氨基甲酸类药物，脑选择性乙酰胆碱抑制剂，可改善阿尔茨海默病患者胆碱介导的认知功能障碍，其结构式为：

化学名：N-乙基-3-[(1S)-二甲氨基乙酰]-N-甲基氨基甲酸苯酯(2R，3R)-2，3-二羟基丁酸盐，该分子中含1个手性碳原子。作为治疗人类疾病的药品，其疗效和安全性与杂质含量有直接的关系，有必要控制卡巴拉汀原料药和制剂中卡巴拉汀对映异构体杂质，因此有必要发现并一个检测卡巴拉汀对映异构体，控制卡巴拉汀及含有卡巴拉汀的药物制剂的质量。

申请人发现，以环糊精类手性柱，采用缓冲液(pH为3～7)-有机改性剂组成的反相流动相系统，或以含有弱酸或弱碱的正己烷与异丙醇组成的正相流动相系统，流速为0.8mL/min，检测波长为240nm，采用该方法可以快速的拆分卡巴拉汀对映异构体、可用于卡巴拉汀的质量控制。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分析分离卡巴拉汀对映异构体杂质的高效液相色谱方法，从而实现快速卡巴拉汀对映异构体杂质的分离测定。

本发明所说的用高效液相色谱法分析分离卡巴拉汀对映异构体杂质的方法，色谱条件为以环糊精类手性柱，以缓冲液(pH为3～7)-有机改性剂组成的反相流动相系统或以含有弱酸或弱碱的正己烷与异丙醇组成的正相流动相系统，流速为0.8mL/min，检测波长为240nm。

环糊精类手性色谱柱可为Cyclobond I 2000(250mm×4.6mm)手性柱。

本发明所述的反相流动相系统中缓冲盐选自：庚烷磺酸钠-磷酸氢二钠、辛烷磺酸钠-磷酸氢二钠、十二烷基硫酸钠-磷酸氢二钠、磷酸氢二钠、醋酸盐。

本发明的反相及正相流动相系统中有机改性剂选自：乙腈、甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇，优选甲醇或异丙醇，最优选异丙醇。

本发明的正相及反相流动相系统中有机改性剂所占混合流动相溶液的体积百分比为20％～5％，优选15％～5％，最优选10％。

本发明所述的拆分方法中流动相缓冲液的pH值为3～7，优选pH值为4-～6，最优选pH值为4。

本发明所述的分析分离方法，可按照以下方法实现：

(1)取消旋卡巴拉汀样品适量，用甲醇溶解样品，配制成每1mL含卡巴拉汀0.05～0.2mg的样品溶液。

(2)设置流动相流速为0.8mL/min，检测波长为240nm，色谱柱柱温箱为30℃。

(3)取(1)的样品溶液2-50μL注入液相色谱仪，记录色谱图。

采用本发明方法，能够有效拆分卡巴拉汀对映异构体，使两者的分离度达到《中国药典》有关要求，本发明的方法能简便、快速、准确地分析分离卡巴拉汀对映异构体。

附图说明：

图1：保留时间7.00min为卡巴拉汀，保留时间9.20min为其对映异构体(杂质)，两者的分离度为3.667；

图2：保留时间5.55min为卡巴拉汀，保留时间7.150min为其对映异构体(杂质)，两者的分离度为1.940；

图3：保留时间9.55min为卡巴拉汀，保留时间14.100min为其对映异构体(杂质)，两者的分离度为2.354；

图4：保留时间9.23min为卡巴拉汀，保留时间5.875min为其对映异构体(杂质)，两者的分离度为5.166；

图5：保留时间14.10min为卡巴拉汀，保留时间9.450min为其对映异构体(杂质)，两者的分离度为2.583；

图6：保留时间16.76min为卡巴拉汀，保留时间15.325min为其对映异构体(杂质)，两者的分离度为0.882；

图7：保留时间为12.89min为卡巴拉汀消旋体。

具体实施方式：

实施例1

仪器与条件：

高效液相色谱仪：岛津，LC-10ATvp，SPD-M10Avp，SCL-10Avp，DGU-12A；

色谱柱：Cyclobond I 2000(250mm×4.6mm)；流动相：水-乙腈＝80：20(v/v)；流速：0.8mL/min；检测波长：240nm；柱温：30℃；进样体积：10μL。

实验步骤：

(1)取卡巴拉汀外消旋体10mg，置100mL容量瓶中，加甲醇溶解稀释置刻度，摇匀，作为供试品溶液。