[发明专利]固定化双酶法制备N－乙酰神经氨酸有效
| 申请号： | 200610117197.2 | 申请日： | 2006-10-17 |
| 公开（公告）号： | CN101165190A | 公开（公告）日： | 2008-04-23 |
| 发明（设计）人： | 杨蕴刘;陈军;白骅;饶娆;胡世元;邵丽君;罗家立;杨仲毅;姜卫红;杨晟 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生命科学研究院;浙江海正药业股份有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/26 | 分类号： | C12P19/26 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人： | 徐迅 |
| 地址： | 20003*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 固定 化双酶 法制 乙酰 神经 氨酸 | ||
1.一种制备N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，它包括步骤：
(a)将N-乙酰葡萄糖胺和丙酮酸或其盐与0.6-10U/ml固定化N-乙酰葡萄糖胺-2-差向异构酶和1.2-10U/ml固定化N-乙酰神经氨酸醛缩酶混合得到反应混合物；
(b)从反应混合物中分离得到N-乙酰神经氨酸。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的N-乙酰葡萄糖胺-2-差向异构酶和N-乙酰神经氨酸醛缩酶是重组的N-乙酰葡萄糖胺-2-差向异构酶和N-乙酰神经氨酸醛缩酶。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的N-乙酰葡萄糖胺-2-差向异构酶和N-乙酰神经氨酸醛缩酶N末端都有6个组氨酸残基。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的固定化酶所用载体为陶瓷、玻璃、高分子合成材料、木炭、或纤维素。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)中固定化N-乙酰葡萄糖胺-2-差向异构酶的用量为1.2-2.5U/ml。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)中固定化N-乙酰神经氨酸醛缩酶用量为2.5-5U/ml。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)中固定化N-乙酰葡萄糖胺-2-差向异构酶和固定化N-乙酰神经氨酸醛缩酶的用量配比为0.1-10∶1。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)中还包括添加丙酮酸或其盐，从而维持反应体系中丙酮酸或其盐的浓度为0.2-0.6M。
9.如权利要求7所述的方法，其特征在于，在反应中补加1-4次丙酮酸或其盐。
10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)的反应体系中pH为7-9，温度为22-32℃。
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