[发明专利]一种嗜酸乳杆菌及其在改善血脂代谢和免疫调节中的应用有效
申请号: | 200610127151.9 | 申请日: | 2006-09-07 |
公开(公告)号: | CN101139558A | 公开(公告)日: | 2008-03-12 |
发明(设计)人: | 孟和毕力格;张和平 | 申请(专利权)人: | 内蒙古农业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A23C9/123;A23K1/16;C12R1/23 |
代理公司: | 北京国林贸知识产权代理有限公司 | 代理人: | 王敬智;许文娟 |
地址: | 010018内蒙古自治区呼和浩特市昭乌达路*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 酸乳 杆菌 及其 改善 血脂 代谢 免疫调节 中的 应用 | ||
1.一种嗜酸乳杆菌,其特征在于:所述嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus MG2-1)是从酸马奶中分离的耐酸和耐胆汁酸的益生菌,该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心,保藏号:CGMCC No.1698。
2.一种如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌的应用,其特征在于:所述嗜酸乳杆菌在改善血脂代谢和免疫调节中的应用。
3.根据权利要求2所述的嗜酸乳杆菌的应用,其特征在于:所述嗜酸乳杆菌在发酵剂或添加的发酵乳、健康食品以及动物保健制品中的应用。
4.一种如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌的制备方法,其特征在于:
a.以酸马奶为乳杆菌分离样品,取2mL所述酸马奶放入灭菌小试管中,再取1mL所述酸马奶放入装有灭菌CaCO3粉的无菌容积为2mL的采样瓶中,作为备用样品放在冰箱内在4℃条件下冷藏;然后用一灭菌吸管吸取1mL所述酸马奶样品并接种于10mL石蕊牛乳培养基中;
b.将所述接种的培养基置于30℃恒温箱中增菌培养至培养基酸化凝固并呈现粉红色时取出;用灭菌接种环再将经过增菌培养的菌株划线接种于含有10ppm放线菌酮和10ppm硫酸粘菌素的BL琼脂培养基中;
c.然后将其放入BBLgaspak厌氧培养罐中,置于30~37℃条件下培养48~72小时,形成菌落;用接种环挑取菌落,接种于MRS培养液中,置于30~37℃条件下培养24~48小时,使菌株生长;
d.待菌株生长良好后,再次用接种环划线将菌株接种于BL琼脂培养基中,置于30~37℃条件下培养24~48小时,观察记录菌落形态和革兰氏染色细胞形态特征,并进行革兰氏阳性、过氧化氢酶试验,分离出在所述试验中呈阴性的杆菌,所述杆菌为乳杆菌;
e.将所述乳杆菌进一步纯化培养,并进行低温保存;将所述分离的乳杆菌菌株经过分析鉴定后制成乳杆菌菌液,吸取所述乳杆菌悬浮液10μL接种于5mL PH3.5的MRS液体培养基中,置于37℃条件下进行24小时培养;同时吸取乳杆菌悬浮液1.0mL与9.0mL PH3.0的人工胃液混合后,置于37℃条件下培养,分别在培养开始时间0小时和培养3小时后取样;
f.然后用BCP琼脂培养基测定活菌数,筛选出具有高耐酸性生长的乳杆菌菌株;进一步测定所述乳杆菌菌株在不同人工胃液和肠液中的存活能力以及通过体外耐胆盐试验和降低胆固醇试验,由此获得嗜酸乳杆菌。
5.根据权利要求4所述的嗜酸乳杆菌的制备方法,其特征在于:所述嗜酸乳杆菌低温保存为低温真空冷冻保存。
6.根据权利要求4所述的嗜酸乳杆菌的制备方法,其特征在于:所述嗜酸乳杆菌低温保存为-85℃冻结保存。
7.根据权利要求4所述的嗜酸乳杆菌的制备方法,其特征在于:所述嗜酸乳杆菌低温保存为4℃条件下冷藏保存。
8.根据权利要求4所述的嗜酸乳杆菌的制备方法,其特征在于:所述人工胃液的制备方法:NaCl 0.2%、胃蛋白酶pepsin,sigma 0.35%,用1mol/LHCl调整pH值为3.0后,过滤除菌备用。
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