[发明专利]一种嗜酸乳杆菌及其在改善血脂代谢和免疫调节中的应用

说明书

技术领域

一种嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus MG2-1)菌株是从蒙古国传统乳制品--酸马奶中分离出来，并应用在该菌株为发酵剂或添加的发酵乳、健康食品以及动物保健制品中。

技术背景

乳杆菌与人类生活关系密切，是广泛应用于食品发酵、工业乳酸发酵及医疗保健领域中的有益微生物之一。现已认识的乳杆菌属和双歧杆菌属中的许多种菌株，具有特定的优良性质和遗传性状，表现出极强的益生菌特性。诸如，耐酸性、耐受胆汁酸、在消化道中定殖生长和需氧生长发育以及缓解乳糖不忍耐症、抗变异突变、降低血清胆固醇、抗肿瘤、抑制肠道病原菌和抗Helicobacter pylori、改善肠道菌群和提高机体免疫功能等等。

发明内容

本发明针对上述课题，从蒙古国传统功能性发酵乳--酸马奶中分离乳杆菌，采用体外耐酸性试验、耐胆酸盐试验、降胆固醇试验等一系列试验筛选一株具有潜在益生作用的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilusMG2-1)，并通过动物实验证实了降低血清胆固醇含量及提高免疫力的功能。

本发明所要解决的技术问题是提供一种嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus MG2-1)的新菌株及其制备方法。该嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus MG2-1)新菌株已于2006年4月21日，在地址为中国北京市海淀区中关村北一条13号，中国科学院微生物研究所内的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心(国家专利局指定专利微生物保藏中心)保藏，保藏号CGMCC No.1698。

本发明另一解决的问题是公开该菌株在降低血清胆固醇含量和提高免疫力方面的应用。

一种嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus MG2-1)是从酸马奶中分离的耐酸和耐胆汁酸的益生菌，该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏号：CGMCC No.1698。

所述嗜酸乳杆菌在改善血脂代谢和免疫调节中的应用。

所述嗜酸乳杆菌在发酵剂或添加的发酵乳、健康食品以及动物保健制品中的应用。

一种嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus MG2-1)的制备方法：

a.以酸马奶为乳杆菌分离样品，取2mL所述酸马奶放入灭菌小试管中，再取1mL所述酸马奶放入装有灭菌CaCO3粉的无菌容积为2mL的采样瓶中，作为备用样品放在冰箱内在4℃条件下冷藏；然后用一灭菌吸管吸取1mL所述酸马奶样品并接种于10mL石蕊牛乳培养基中；

b.将所述接种的培养基置于30℃恒温箱中增菌培养至培养基酸化凝固并呈现粉红色时取出；用灭菌接种环再将经过增菌培养的菌株划线接种于含有10ppm放线菌酮和10ppm硫酸粘菌素的BL琼脂培养基中；

c.然后将其放入BBL^gaspak厌氧培养罐中，置于30～37℃条件下培养48～72小时，形成菌落；用接种环挑取菌落，接种于MRS培养液中，置于30～37℃条件下培养24～48小时，使菌株生长；

d.待菌株生长良好后，再次用接种环划线将菌株接种于BL琼脂培养基中，置于30～37℃条件下培养24～48小时，观察记录菌落形态和革兰氏染色细胞形态特征，并进行革兰氏阳性、过氧化氢酶试验，分离出在所述试验中呈阴性的杆菌，所述杆菌为乳杆菌；

e.将所述乳杆菌进一步纯化培养，并进行低温保存；将所述分离的乳杆菌菌株经过分析鉴定后制成乳杆菌菌液，吸取所述乳杆菌悬浮液10μL接种于5mL PH3.5的MRS液体培养基中，置于37℃条件下进行24小时培养；同时吸取乳杆菌悬浮液1.0mL与9.0mL PH3.0的人工胃液混合后，置于37℃条件下培养，分别在培养开始时间0小时和培养3小时后取样；

f.然后用BCP琼脂培养基测定活菌数，筛选出具有高耐酸性生长的乳杆菌菌株；进一步测定所述乳杆菌菌株在不同人工胃液和肠液中的存活能力以及通过体外耐胆盐试验和降低胆固醇试验，由此获得嗜酸乳杆菌。

所述乳杆菌低温保存为低温真空冷冻保存。

所述乳杆菌低温保存为-85℃冻结保存。

所述乳杆菌低温保存为4℃条件下冷藏保存。

所述人工胃液的制备方法：NaCl0.2％、胃蛋白酶pepsin，sigma 0.35％，用1mol/L HCl调整pH值为3.0后，过滤除菌备用。