[发明专利]人工蛹虫草培养基残基中虫草素提取工艺

权利要求书

1.一种人工蛹虫草培养基残基中虫草素提取工艺，其特征是包括对人工蛹虫草培养基残基脱脂，然后调节等电点、除色素、柱洗脱四个步骤。

2.如权利要求1所述的人工蛹虫草培养基残基中虫草素提取工艺，其特征是所述脱脂步骤中可采取热水提取或热乙醇提取，其中优选方案为热乙醇提取；脱脂后对残基回收乙醇转入水溶进行调节等电点，调节到PH3.5，除去部分蛋白质及杂质；所述除色素步骤先采用添加活性碳吸附，然后对样品过阳离子交换树脂；所述柱洗脱步骤开始时流速控制在不大于5滴/秒，并少量多次收集洗脱液，等大部分杂质洗脱完毕后，流速即可加快，最后可得到较纯的虫草素。

3.如权利要求2所述的人工蛹虫草培养基残基中虫草素提取工艺，其特征是先取1000克干燥的蛹虫草培养基1经粉碎后用4-8升石油醚室温浸泡12-36小时脱脂，过滤，得到残基2；将残基2烘干，用4-8升乙醇50-100℃提取6-24小时，冷却后过滤，减压回收溶剂至干，得到20-30克浸膏；将浸膏用250-500毫升蒸馏水热溶，不溶物过滤。滤液中滴加1.0-2.5mol/L HCl，直至溶液PH为3.0-4.0时，停止滴加，有沉淀产生，过滤，得到滤液1；在滤液1中按重量比1-8％加入活性碳，超声振荡1-10小时，过滤，得到滤液2；将滤液加入到经处理好732-型阳离子交换树脂，并用2-5倍柱体积PH3.0-4.0的盐酸平衡液固定虫草素，再用5-15升的蒸馏水过柱，去除杂质；最后用0.10-0.20mol/L的NH₃H₂O洗脱液洗脱，流速为5滴/秒，开始时每20毫升收集一瓶，后改为每50毫升收集一瓶，HPLC检测，以虫草素标准品对照，直至虫草素洗脱完毕；合并以虫草素为主成分的流份，减压浓缩至小体积，冰箱放置，过夜，析出虫草素。

4.如权利要求3所述的人工蛹虫草培养基残基中虫草素提取工艺，其特征是所述蛹虫草培养基1经粉碎后用4-8升石油醚脱脂、过滤时分两次进行，每次用一半溶剂；所述残基2烘干后用4-8升乙醇提取时，分两次进行，每次用一半溶剂。