[发明专利]一种鳗弧菌油乳化二价口服疫苗及其制备

权利要求书

1.一种鳗弧菌油乳化二价口服疫苗，其特征在于：疫苗由油相和水相组成，水相中加入利斯顿氏菌属Listonella MacDonellet Collwell的鳗利斯顿氏菌Vibrio anguillarum O1血清型两种亚型菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC No.1870和CGMCC No.1871)的菌悬液。

2.根据权利要求1所述的鳗弧菌油乳化二价口服疫苗，其特征在于：所述水相为Tween-80，按体积百分比计94％-98％的鳗利斯顿氏菌O1血清型两种亚型菌株的菌悬液和2％-6％的Tween-80；油相为：Span-80、硬脂酸铝和运动黏度7-13的白矿油；油相中各成份为：按体积百分比计92％-96％的运动黏度7-13的白矿油和4％-8％的Span-80和按油相总质量体积比的1.5％-2.5％的硬脂酸铝，其中水相和油相按体积比计为1∶1.5-2，所述两种菌悬液浓度各为1-610⁹cells/ml。

3.一种根据权利要求1所述的鳗弧菌油乳化二价口服疫苗的制备方法，其特征在于：

1)制备乳化疫苗的水相：将Tween-80加入到复壮培养培养后并甲醛灭活的利斯顿氏菌属Listonella MacDonellet Collwell的鳗利斯顿氏菌Vibrioanguillarum O1血清型两种亚型菌株CGMCC No.1870和CGMCC No.1871的菌液中，搅拌混匀，得到乳化疫苗的水相；其中菌悬液占水相体积比的94％-98％，Tween-80占水相体积比的2％-6％；

2)制备乳化疫苗的油相：按体积百分比计取92％-96％的运动黏度7-13的白矿油、4％-8％的Span-80和按总油相质量体积比1.5％-2.5％的硬脂酸铝，将其混合，加热使硬脂酸铝溶化，即得到乳化疫苗的油相；

3)制备乳化疫苗：1倍体积的水相缓慢加入到1.5-2倍体积油相中，以1000-1500rpm的转速进行磁力搅拌10-20分钟，即得到油包水性乳化二价疫苗。

4.根据权利要求3所述的鳗弧菌油乳化二价口服疫苗的制备方法，其特征在于：所述两种菌株复壮培养至浓度各为大于10⁹cells/ml。