[发明专利]土鳖干粉水提物和酶解物的制备及在医学中的应用

权利要求书

1.一种土鳖虫水提多肽粗粉W₀，主要由以下工艺制备得到：将土鳖干粉与蒸馏水按3∶100(w/v)的比例悬浮、37℃±3℃恒温搅拌40分钟、过滤、滤液冷冻干燥、得到的水提多肽粗粉W₀。

2.土鳖虫W_I、W_II、W_III和W_IV四种水提多肽组分，主要由以下工艺制备得到：将权利要求1土鳖虫水提多肽粗粉W₀与蒸馏水按10∶1(w/v)的比例溶解、10000rpm离心10分钟、上清液加载到Sephadex G25层析柱上、以0.005mol/L乙酸胺缓冲液洗脱，流速0.5mL/min，紫外检测波长280nm；将所收集的馏份按峰合并、冷冻干燥、得到W_I、W_II、W_III和W_IV四种水提多肽组分。

3.土鳖虫水提多肽组分W_IV的HPLC指纹图谱，为图1所示；W_IV的HPLC-ESI-MS指纹图谱，为图2所示。

4.权利要求2的土鳖虫水提多肽组分W_IV的多肽序列，其氨基酸序列为Ser-Cys-Leu(Ile)-Ser-Pro-Val-Ser-Leu(Ile)-Thr-Arg-Pro-Trp。

5.权利要求1、2或3的任意一种水提多肽组分制备治疗带状疱疹药物的用途。

6.土鳖虫酶解多肽粗粉E₀，主要由以下工艺制备得到：将土鳖虫干粉与蒸馏水按1∶20(w/v)的比例悬浮，得到的悬浮液与模拟胃液按1∶1的体积比例混合、37℃±3℃恒温振荡4小时、减压过滤、滤液用NaHCO₃调pH7.0、3000rpm离心5分钟、收集上清液、冷冻干燥，得到酶解多肽粗品E₀。

7.土鳖虫E_I、E_II和E_III三种酶解多肽组分，主要由以下工艺制备得到：将土鳖虫酶解多肽粗粉E₀与蒸馏水按10∶1(w/v)的比例溶解、10000rpm离心10分钟、上清液加载到Sephadex G25层析柱上、以0.005mol/L乙酸胺缓冲液洗脱，流速0.5mL/min，紫外检测波长280nm；将所收集的馏份按峰合并、冷冻干燥，得到E_I、E_II和E_III三种多肽组分。

8.权利要求7E_I、E_II和E_III3种酶解多肽组分的指纹图谱，其中，E_I的HPLC指纹图谱为图5所示，E_I的HPLC-ESI-MS指纹图谱为图8所示；E_II的HPLC指纹图谱为图6所示，E_II的HPLC-ESI-MS指纹图谱为图9所示；E_III的HPLC指纹图谱为图7所示，E_III的HPLC-ESI-MS指纹图谱为图10所示。

9.权利要求7的E_I、E_II和E_III三种酶解多肽组分的多肽序列，其氨基酸序列如下：H-Tyr-Gly-Val-Pro-Pro-Asn-Pro-Leu(Ile)-Ser-Thr-Ser-OH、H-Met-Ser-Met-Met-Thr-His-Asn-Glu-Ala-Asp-OH、H-His-Gly-Val-Met-Arg-His-Met-Asn-Phe-Ala-Ala-Tyr-Met-OH。

10.权利要求6、7或9任意一种酶解多肽组分制备治疗带状疱疹药物中的用途。