[发明专利]高纯度载脂蛋白A－I的制备方法有效
| 申请号： | 200610147503.7 | 申请日： | 2006-12-20 |
| 公开（公告）号： | CN101205250A | 公开（公告）日： | 2008-06-25 |
| 发明（设计）人： | 黄凯;何秋;许必雄;包骧飞;李军辉;沈积慧;李春洲 | 申请（专利权）人： | 上海莱士血液制品股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/18 | 分类号： | C07K1/18;C07K14/775 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人： | 徐迅 |
| 地址： | 200245上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 纯度 脂蛋白 制备 方法 | ||
1.一种获得载脂蛋白A-I的方法，其特征在于，它包括步骤：
a.将经Cohn低温乙醇法获得的组份四和1-8M的尿素混合形成组份四预处理溶液；
b.步骤a得到的组份四预处理溶液流过阴离子交换层析柱后，用含1-8M尿素，电导值1-4ms/cm的缓冲液I洗涤层析柱，得到含初步纯化的载脂蛋白A-I的洗脱液I；
c.洗脱液I流过阴离子交换层析柱，用电导值1-15ms/cm的缓冲液II洗脱杂质后用电导30-100ms/cm的缓冲液III洗脱下纯化的载脂蛋白A-I。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤a、b中所述的尿素浓度为3-8M。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤a、b中所述的尿素浓度为5-7M。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，缓冲液I的电导值为2-4ms/cm；缓冲液II的电导值为7-15ms/cm；缓冲液III的电导值为70-95ms/cm。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的阴离子交换层析柱为弱酸性或弱碱性阴离子交换层析柱。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤a中组份四和尿素的重量比为1∶30-300。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤b、c中的洗脱缓冲液I、II或III中含有NaCl、KCl、MgCl2或CaCl2。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤a和b之间还包括步骤a’：将组份四预处理溶液离心除不溶性杂质，并用滤膜过滤。
9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤b和c之间还包括步骤b’：用电导值4.5-70ms/cm的缓冲液IV洗脱除去大部分杂质。
10.如权利要求1-9任一所述的方法，其特征在于，所述的各缓冲液pH7.2-8.5。
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