[发明专利]一种牡丹叶总苷提取物及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明属于中药新药研发领域。涉及一种从中药材新的药用部位中分离得到有效部位，并提供其制备方法和医药用途。

背景技术

牡丹不仅是观赏性植物，其还可以作为药用。2005年版的《中国药典》收载牡丹皮(亦称丹皮)作为法定的中药材使用。牡丹皮是毛茛科芍药属植物牡丹(Paeonina suffruticosa Andr.)的干燥根皮。目前，关于牡丹皮的化学成分及其有效部位研究的很多。根据文献报道，牡丹皮中主要含有牡丹酚、牡丹酚甙、牡丹酚原甙、牡丹酚新甙、芍药甙、羟基芍药甙、苯甲酰芍药甙、苯甲酰羟基芍药甙、没食子酸、挥发油、无机元素等。现代药理研究表明，牡丹皮具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、降血糖、降压、抗心肌缺血、抗心律失常、抗血栓和动脉硬化、免疫调节等作用(“牡丹皮药理作用的研究进展”《中国新医药》2004年第3卷第8期p110-111)。其有效部位丹皮多糖有降血糖作用，丹皮总苷有治疗乙肝、免疫调节、抗炎的作用。但是牡丹皮采收周期较长(3年)，同时取其根部，植株无法存活，因此从合理利用药材资源出发，考虑是否可以开发药材的其它部位作为药用，研究其化学成分，明确有效部位，发现新的医药用途，是医药研发人员努力研究的方向。

牡丹叶为毛茛科芍药属植物牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)的干燥叶，据文献报道，牡丹叶中含有苷类，酚类，酚酸类，鞣质，黄酮，糖类等化学成分。目前，对牡丹叶的化学成分及其药理活性研究的很少，并且未见到关于从牡丹叶中提取分离有效部位的文献报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题之一是提供一种牡丹叶总苷提取物，其中的活性成分是来自于牡丹叶中的有效部位——牡丹叶总苷。

本发明进一步提供了以上述牡丹叶总苷为活性成分，用于治疗糖尿病、冠心病的纯中药药物制剂和相应的药物剂型。

本发明要解决的另一个技术问题是提供用于治疗糖尿病、冠心病的牡丹叶总苷提取物的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明研究制定了如下技术方案。

本发明所用的牡丹叶为毛茛科植物牡丹Paeonia suffruticosa Andr.的干燥叶。本发明人经过多年的研究，用牡丹叶为原料，经过溶剂提取、大孔树脂吸附、溶剂洗脱、洗脱液浓缩干燥，得到牡丹叶总苷提取物，其中含有牡丹叶总苷重量百分比为50％～95％。该提取物中主要含有芍药苷、羟基芍药苷、苯甲酰芍药苷、苯甲酰羟基芍药苷等。其中芍药苷的重量百分比为45％～95％。

本发明比较优选的实施方案，牡丹叶总苷是通过下述方法制备得到的：

(1)以牡丹叶为原料，用水或含水的乙醇提取；

(2)浓缩提取液，至相对密度为1.20的浸膏，加水使浸膏溶解，离心，得上清液；

(3)上清液通过大孔吸附树脂柱，依次用水、含水乙醇洗脱除杂；

(4)以乙醇或含水乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液浓缩干燥，得牡丹叶总苷提取物。

本发明所述的制备方法中提取选用的乙醇浓度为X，0＜X≤95％，优选为50≤X≤95％；提取方法可以是渗漉提取或回流提取，乙醇与原料之间应保持比较大的比例，以保证提取完全，可以使用8～16倍药材重量的溶剂提取2～3次。

所述的吸附树脂可以为苯乙烯、二乙烯苯、丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯中的任意一种或几种为骨架材料的树脂，具体可包括ZTC-1、D101、AB-8或DM301型树脂。优选为ZTC-1树脂。

所述除杂的过程中先用4～10倍于树脂体积(V/W)的水，再用2～5倍树脂体积(V/W)的含水乙醇，乙醇浓度为X，5≤X≤20％。洗去柱内未被吸附的杂质，使用该方法能够有效地去除杂质。

所述制备方法中洗脱所用的乙醇的浓度为X，20≤X≤95％；优选为20≤X≤40％。并确定以4～12倍于树脂体积(V/W)的含水乙醇洗脱，洗脱液浓缩干燥，得牡丹叶总苷提取物。

在除杂及解吸的过程中，可通过随时检测洗脱液中牡丹叶总苷的含量来监控除杂或洗脱乙醇的用量，控制除杂或洗脱的时间。牡丹叶总苷的含量测定方法可通过本领域内公知的方法进行测定，本发明在此提供一套可行的高效液相色谱测定方法。具体如下：

1、对照品溶液的制备  精密称取苯甲酸对照品9.53mg，置于100ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，得对照品储备液(0.0953mg/ml)。再精密吸取1ml上述溶液置10ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液(9.53μg/ml)。