[发明专利]诊断原发性恶性肝肿瘤肝细胞癌的方法

说明书

交叉参考相关申请

[0002]本申请要求2005年11月28日申请的U.S.临时申请No.60/740,223的利益，将其公开的内容引入本文作为参考。

发明背景

[0003]本申请涉及诊断肝细胞癌的方法(HCC)。

[0004]HCC为一种世界上最常见的恶性肿瘤，其全球发病率逐年增加。HCC通常发病于患有慢性肝炎的患者中，通常由B或C型病毒感染引起。尽管外科切除是用于这些疾病有效的疗法，但是肿瘤切除后的复发率非常高。肝病的潜在微观的肝内或肝外转移和背景因子，包括活跃性炎症，已被认为是肿瘤复发的重要危险因素。

[0005]HCC的单个最重要的肿瘤标记物为α-胎儿球蛋白(AFP)。用血清AFP水平和超声检查法检测的HCC已被推荐用于肝硬化的患者。尽管很好地建立起了在HCC的筛查和诊断过程中检测血清AFP水平，但是其主要缺点是血清AFP对早期癌的检测不灵敏。存在其它有希望的肿瘤标记物，例如脱-γ-羧基凝血素、乒豆凝集素活性AFP(lens culinaris agglutinin-reactive AFP)、胰腺炎相关蛋白和胰岛素样生长因子-1，但是这些标记物中没有一种被批准用于临床应用。

[0006]人类肝细胞生长因子(HGF)第一次描述为肝营养因子是在八十年代早期，发现于部分肝切除的大鼠血浆中，其在1986-1987从患有暴发性肝功能衰竭的患者和大鼠血小板中纯化。已显示HGF为与散射因子和肿瘤细胞毒素因子相同的蛋白，现在已知其为光谱生长因子，其不仅刺激肝细胞生长，还刺激许多其它类型的上皮和内皮细胞生长。在人类中，在严重肝病例如暴发性肝功能衰竭期间，HGF的血浆水平增长至高于10ng/ml，当患者的疾病康复后，其快速降低至正常水平。在不特别严重的肝损伤例如急性肝炎中，血浆中HGF的水平增加至0.5-1ng/ml，其接近用于刺激培养基中人类肝细胞DNA合成的半数最大浓度。因此，认为HGF参与控制肝再生。也表明HGF与包括HCC的某些人类癌症有关。

[0007]白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)为由一定范围的细胞生成的多功能细胞因子，在宿主防御机制和调节免疫应答中起重要作用。最近，表明IL-6由表皮细胞和表皮样癌细胞系以及其它上皮细胞瘤生成，所述其它上皮肿瘤包括膀胱癌、肾细胞癌和卵巢癌。在患有多发性骨髓瘤、肾细胞癌、膀胱癌、头癌和颈部癌、卵巢癌和胆管癌的患者中发现血清IL-6水平增加。在患有晚期HCC的患者中观察到高血清IL-6水平(Malaguarnera等人，“Role de I’interleukine 6 dansle carcinoma hepatocellulaire，”(1996)Bull Cancer 83：379-384)。

[0008]IL-10为由巨噬细胞、T辅助细胞-2和B淋巴细胞(CD5亚型)生成的多效细胞因子，可刺激和抑制免疫应答。已表明IL-10抑制多种免疫功能，例如抗原呈递、细胞因子生成、巨噬细胞活化和抗原特异性T-细胞增殖。通过干扰抗原呈递细胞的共刺激作用(例如下调单核细胞的II型MHC的表达和共刺激巨噬细胞的分子表达)，IL-10减少了抗原特异性T-细胞增殖。最近，已提出IL-10在赘生物的肿瘤生成能力和转移能力中起重要作用，在患有多种组织分型的实体瘤和造血病性肿瘤(hematopoietic tumors)的患者血浆中发现其水平增加。在患有慢性丙型肝炎的患者中发现观察到血清IL-10水平显著升高，IL-10可能与HCC的发展有关(Kakumu等人，“Serum levels of IL-10，IL-15and soluble tumor necrosisfactor-alpha(TNF-a)receptors in type C chronic liver disease，”(1997)Clin ExpImmunol109：458-463).

[0009]IL-10和IL-6的血清水平是否与患有相对早期和可切除的HCC患者的预后有关还不得而知。作为HCC的肿瘤标记物的IL-6、IL-10和HGF的可能作用与他们与AFP的相互关系还不完全清除。存在用于HCC诊断的有效方法的需要，特别是在该病的早期诊断。

发明概述