[发明专利]多肽和五糖的偶联物

说明书

技术领域

本发明涉及新的多肽和寡糖的偶联物、其制备方法、包含这些化合物作为活性成分的药物组合物以及所述化合物的制药用途。

背景技术

DNA重组技术和先进的肽合成方法的最新发展使得药用有效量的治疗性多肽的商品化生产成为可能。然而，许多治疗性多肽具有较短的半衰期，这在历史上已经对这些化合物的给药提出了质疑。当前正在使用的若干种重要的基于多肽的药物均得益于它们的延长了的半衰期。例子有其半衰期(显著地)短于几个小时的红细胞生成素、胰岛素、干扰素α-2b、干扰素β、干扰素γ、粒细胞集落刺激因子、人生长激素、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、松弛素、尿激酶、链激酶、组织纤溶酶原激活物、降钙素、白介素-2和肿瘤坏死因子。例如，胰岛素在人体内的半衰期仅为大约12分钟。作为可能的治疗剂正在研制的但仍受到较短半衰期限制的多肽的其他例子有肾上腺髓质素、高血糖素样肽(GLP-1)和kisspeptin(metastin)。延长治疗性多肽的半衰期能够通过减少给药剂量和降低给药频率来改善当前的治疗(Curr.Opin.Drug Disc.Dev.2005，8，590-600)。

为了延长其体内半衰期，已经利用例如通过聚乙二醇化的改变(也就是与一个1-30kDa聚乙二醇部分结合；Drug Discovery Today2005，10，1451-1458)对许多蛋白质进行了研究。当前可用的例子有延长了半衰期的胰岛素的聚乙二醇化类似物。近来的胰岛素衍生物除了具有降低了的清除率之外，重要方面是还具有降低了的免疫原性(例如US 4,179,337)和增加了的溶解度。此外，在胰岛素的聚乙二醇化方面的发展还生成了比天然胰岛素在物理上和蛋白水解性上更稳定的偶联物(例如参见WO 2004/091494、WO 2002/098232、US2005/0152848)。

例如在WO 2004/022577中描述了具有较长血清半衰期的聚乙二醇化红细胞生成素。还发现，通过改变的红细胞生成素的糖基化，其半衰期延长。另外，报道了红细胞生成素的高度糖基化类似物具有较高的体内活性(WO 2000/24893)。具有延长的作用时间的聚乙二醇化(多)肽的其他例子有高血糖素样肽-1(GLP-1)(WO 2005/058954、WO2004/093823；Bio Conjuga te Chem.2005，16，377-382；Biomaterials，2005，26，3597-3606)、葡萄糖依赖性促胰岛多肽(GIP)(Bioorg.Med.Chem.Lett.，2005，15，4114-4117)、降钙素(Pharm.Dev.Technol.1999，4，269-275)和抑生长肽(Pharm.Res.2005，22，743-749)。

然而，聚乙二醇(PEG)的使用有很多限制。PEG是通过化学合成获得的，并且与所有合成聚合物一样是多分散性的。这意味着一批PEG是由具有不同数目单体的分子组成的，从而导致分子量的高斯分布。当多肽是PFG化的时，可生成许多可能具有不同生物学特性，尤其在半衰期和免疫原性方面的偶联物。因此，该技术的严重的缺陷可能是PFG化多肽的药理活性的再现性。除此之外，已知蛋白质的聚乙二醇化通常伴随着生物活性的丧失。此外，PEG的使用还可能造成涉及从体内排出的问题。高分子量的PEG可蓄积在肝脏中，导致大分子综合征。因而，应当非常小心地进行药物的聚乙二醇化。

如同聚乙二醇化的情况一样通过多肽用，尤其是用聚唾液酸链(例如WO 92/22331和WO 2001/87922)衍生多糖获得相似的结果。

JP 02/231077中描述了肝素-超氧化物歧化酶(SOD)偶联物。优选地，使许多肝素分子与SOD相连，得到具有比天然SOD的半衰期长的半衰期同时保持大约90％的酶活性的偶联物。