[发明专利]分离核酸的方法,该核酸在提高的温度下固定于基质上有效
申请号: | 200680004094.3 | 申请日: | 2006-02-13 |
公开(公告)号: | CN101115833A | 公开(公告)日: | 2008-01-30 |
发明(设计)人: | M·斯普伦加-豪斯塞尔;G·舒尔特;T·多伊奇曼;S·费勒克 | 申请(专利权)人: | 恰根有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人: | 徐迅 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分离 核酸 方法 提高 温度 固定 基质 | ||
1.一种分离和/或纯化核酸的方法,所述方法包括以下步骤:
a)裂解生物样品,
b)在离液序列高的化合物和/或支链或直链烷醇存在的情况下,将释放出的核酸 固定在基于一种或多种硅-氧化合物的基质上,并任选洗涤固定在所述基质上的核 酸,
c)用已知方式分离结合的核酸,
其特征在于,所述核酸的固定是在36℃到75℃的温度范围内进行的。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述固定是在46℃到70℃的温度范 围内进行的。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述固定是在50℃到65℃的温度范 围内进行的。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述固定是在56℃的温度下进行的。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述硅-氧化合物为二氧化硅。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述基质为具有二氧化硅表面的磁 性颗粒。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述离液序列高的化合物为离液序 列高的钠盐或胍盐。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,所述离液序列高的钠盐或胍盐为碘 化钠、高氯酸钠、硫氰酸胍、异硫氰酸胍或盐酸胍或两种或多种所述盐的混合物。
9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述支链或直链烷醇为具有1到5 个碳原子的醇。
10.如权利要求9所述的方法,其特征在于,所述醇为甲醇、乙醇、异丙醇、支 链或直链丁醇、戊醇、或所述醇的混合物。
11.如权利要求9或10所述的方法,其特征在于,所述醇以水溶液形式存在, 其浓度从1到100%(体积/体积),优选地从2到80%,更优选地从5到70%,还更 优选地从10到60%,最优选地从15到50%。
12.用权利要求1到11中任一项所述方法分离的核酸。
13.一种在存在离液剂和/或支链或直链烷醇的情况下将核酸固定在基于硅-氧化 合物的基质上的方法,其特征在于,所述核酸的固定是在36℃到75℃的温度范围 内进行的。
14.如权利要求13所述的方法,其特征在于,所述固定在具有二氧化硅表面的 基质上是在存在具有1到5个碳原子的支链或直链烷醇或其水溶液时,在46℃到 70℃的温度范围内进行的。
15.如权利要求14所述的方法,其特征在于,所述固定是在存在甲醇、乙醇、 丙醇、异丙醇、和/或支链或直链丁醇、或戊醇时,或是在存在所述醇或其混合物 的水溶液时,在50℃到65℃的温度范围内进行的。
16.如权利要求15所述的方法,其特征在于,所述固定是在存在浓度范围从1 到100%(体积/体积),优选地从2到80%,更优选地从5到70%,还更优选地从10 到60%,最优选地从15到50%的甲醇、乙醇、丙醇和/或异丙醇的水溶液时,在温 度为56℃时进行的。
17.如权利要求13所述的方法,其特征在于,所述离液序列高的化合物为离液 序列高的钠盐或胍盐。
18.如权利要求17所述的方法,其特征在于,所述离液序列高的钠盐或胍盐为 碘化钠、高氯酸钠、硫氰酸胍、异硫氰酸胍或盐酸胍或两种或多种所述盐的混合物。
19.如权利要求13、17或18中任一项所述的方法,其特征在于,所述固定在具 有二氧化硅表面的基质上是在46℃到70℃的温度范围内进行的。
20.如权利要求19所述的方法,其特征在于,所述固定是在50℃到65℃的温度 范围内进行的。
21.如权利要求20所述的方法,其特征在于,所述固定是在温度为65℃时进行 的。
22.如权利要求13所述的方法,其特征在于,所述基质为具有二氧化硅表面的 磁性颗粒。
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