[发明专利]纯化脂肪酶的制造方法

说明书

技术领域

本发明涉及可适用于各种酯化反应、酯交换反应等的纯化脂肪酶的制造方法，可适用于酯交换反应的酯交换用脂肪酶的制造方法，使用由这些方法得到的脂肪酶的油脂的酯交换方法以及含有该脂肪酶的脂肪酶组合物。

背景技术

脂肪酶广泛应用于脂肪酸等各种羧酸和一元醇或多元醇等醇类的酯化反应、多个羧酸酯间的酯交换反应等中。其中，酯交换反应是作为动植物油脂类的改性，各种脂肪酸的酯、糖酯或甾类化合物的制造方法的重要技术。作为这些反应的催化剂，使用作为油脂水解酶的脂肪酶时，在室温至约70℃左右的温和条件下即可进行酯交换反应，与以往的化学反应相比，不仅可抑制副反应、降低能源成本，而且作为催化剂的脂肪酶是天然物质，因此安全性也很高。另外，利用其基质特异性和位置特异性，可以高效地生产目的物。

另一方面，培养脂肪酶的生产菌时，为了消泡通常在培养基中添加有机硅，添加的有机硅会混入收集的脂肪酶中。用这种脂肪酶进行油脂的酯交换时，所得酯交换油脂中往往混有有机硅，用含有有机硅的油炸食品时有起泡性增高的问题。另一方面，培养脂肪酶的生产菌时，脂肪酶往往会产生色素等，使用这种脂肪酶进行油脂的酯交换时得到的酯交换油脂往往着色、风味变差。

因此，寻求高度除去认为来自有机硅或脂肪酶的各种杂质的纯化脂肪酶。

进而寻求脂肪酶活性提高的酯交换用脂肪酶。

发明内容

因此，本发明的目的在于提供(纯化)脂肪酶的制造方法。

本发明的目的还在于提供(酯交换用)脂肪酶的制造方法。

本发明的目的还在于提供使用上述制造方法得到的脂肪酶的油脂组合物的制造方法。

本发明的目的还在于提供含有上述制造方法得到的脂肪酶的脂肪酶组合物。

本发明正是基于将脂肪酶与长链甘油三脂肪酸酯和中链甘油三脂肪酸酯混合时，脂肪酶中的各种杂质高效地转移到甘油三酯中，可纯化脂肪酶这一知识而达成的。

即，本发明提供(纯化)脂肪酶的制造方法(本发明的第1实施方式)，包括(a)使长链甘油三脂肪酸酯和中链甘油三脂肪酸酯与脂肪酶相接触来纯化该脂肪酶的工序；以及

(b)收集纯化脂肪酶的工序。

本发明提供(酯交换用)脂肪酶的制造方法(本发明的第2实施方式)，包括(a)使甘油的脂肪酸偏酯和/或甘油缩合物的脂肪酸偏酯与脂肪酶相接触的工序；以及

(b)接触后，收集脂肪酶的工序。

本发明还提供油脂组合物的制造方法，其特征在于，在通过上述制造方法制造的脂肪酶存在下，进行油脂的酯交换。

本发明还提供一种脂肪酶组合物，其含有由上述方法制造的脂肪酶和相当于该脂肪酶0.5～5倍质量的甘油三酯。

具体实施方式

首先，对本发明的第1实施方式进行说明。

[长链甘油三脂肪酸酯]

本发明中使用的长链甘油三脂肪酸酯优选为构成脂肪酸的碳数为14～24，优选为16～18的甘油三酯。构成的脂肪酸可以是饱和脂肪酸也可以是不饱和脂肪酸，可以是直链也可以是支链。构成甘油三酯的3个脂肪酸可以是3个完全相同，也可以是2个构成的脂肪酸相同而另1个不同，还可以是3个都互不相同。其中，优选碳数16～22的不饱和脂肪酸，特别优选碳数16～18的直链不饱和脂肪酸。特别优选选自菜籽油、大豆油、葵花籽油、红花油、玉米油中的脂肪酸。这些长链甘油三脂肪酸酯可以单独使用，也可以2种以上并用。

本发明中可用的长链甘油三脂肪酸酯可以用公知的方法制造，也可以使用市售品。市售品例如为日清奥利友集团株式会社出售的商品名为Canola油的产品。

[中链甘油三脂肪酸酯]

本发明中使用的中链甘油三脂肪酸酯优选构成脂肪酸的碳数为6～12，优选为8～10的甘油三酯。构成的脂肪酸可以是饱和脂肪酸也可以是不饱和脂肪酸，可以是直链也可以是支链。构成甘油三酯的3个脂肪酸可以是3个完全相同，也可以是2个构成的脂肪酸相同，还可以是3个都互不相同。其中，优选碳数8～10的饱和脂肪酸。这些中链甘油三脂肪酸酯可以单独使用，也可以2种以上并用。

本发明中可用的中链甘油三脂肪酸酯可以用公知的方法制造，也可以使用市售品。市售品例如为日清奥利友集团株式会社出售的商品名为ODO的产品。

本发明的纯化脂肪酶作为油脂的酯交换用酶使用时，优选本发明中使用的长链甘油三脂肪酸酯和/或中链甘油三脂肪酸酯与进行酯交换的油脂相同。