[发明专利]使用生化标志的肝脂肪变性诊断方法

说明书

技术领域

本发明提供一种通过使用可方便检测的生物学标志的血清浓度来检测患者的肝脂肪变性程度的新诊断方法，具体而言针对患有涉及肝脂肪变性的疾病的患者，或者针对已经作出肝纤维化和/或存在肝坏死性炎症损伤的阳性诊断测试的患者。本发明也提供了实施本方法的诊断试剂盒。

背景技术

脂肪肝，也称肝脂肪变性，定义为脂肪在肝细胞中的过量积累(Bravo AA，等.N.Engl.J.Med.2001：344；495-500；Angulo P.N.Engl.J.Med.2002 Apr 18；346(16)：1221-31)。脂肪肝疾病涉及甘油三酸脂在肝细胞中的积累、肝细胞的坏死、炎症(Day CP.Best Pract.Res.Clin.Gastroenterol.2002；16：663-78；Browning JD，Horton JD.J.Clin.Invest.2004；114：147-52)、肝小静脉闭塞和经常出现的纤维化，有时发展到肝硬化、肝细胞癌症和与肝相关的死亡(El-Serag HB，等.Gastroenterology 2004；126：460-468，Dam-Larsen S，等.Gut 2004；53：750-5)。

肝脂肪变性在世界范围内的罹患率是非常高的，其与几个因素有关，比如酒精、糖尿病、超重、高血脂、胰岛素抵抗、丙型肝炎基因3型、无β脂蛋白血症和一些药物(Bellentani S，等.Ann.Intern.Med.2000；132：112-7；Levitsky J，Mailliard ME.Semin.Liver Dis.2004；24：233-47)。

非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)是肝脏对于可引起非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的胰岛素抵抗的适应性应答，其自身可诱导纤维化应答从而导致肝硬化(Day CP.Best Pract.Res.Clin.Gastroenterol.2002；16：663-78)。

在酒精性肝病的患者中(Sorensen TI，等.Lancet.1984；2：241-4)，慢性丙型肝炎(Fabris P，等.J.Hepatol.2004；41：644-51)，以及可能在乙型肝炎患者中(Phillips MJ，等.Am.J.Pathol.1992；140：1295-308)，肝脂肪变性的存在也与纤维化的发展有关，带有或者不带有相关的坏死性炎症损伤(酒精性或病毒性肝炎)。

对于肝脂肪变性诊断没有标准建议。通常推荐检测GGT和ALT，并进行肝活检，以进行分级和分期(Bellentani S，等.Ann.Intern.Med.2000；132：112-7；Levitsky J，Mailliard ME.Semin.Liver Dis.2004；24：233-47；Bravo AA，等.N.Engl.J.Med.2001：344；495-500)。因为肝活检仍然是一个侵入性和昂贵的程序，并且可能取样错误，所以拥有一种快速且容易实施的检测是有利的，该检测将对患者的肝脂肪变性水平提供良好的预测值。

对于纤维化的诊断，非侵入性的FibroTest(FT)(Biopredictive，Paris France，US专利号6,631,330)已证实可在慢性丙型肝炎(Poynard T.等.Comp Hepatol.2004；3：8)和乙型肝炎(Myers RP，等.J Hepatol.2003；39：222-30)以及最近在酒精性肝病(Callewaert N，等.Nature Med 2004；10；1-6；Naveau S，等.Clin GastroenterolHepatol，印刷中)中作为替代标志。

然而，迄今为止，没有研究表明单一生物学标志或者一组生物学标志可用作肝活检的替代方案，用于在最普通的病因：酒精性、病毒性肝炎和NAFLD中，诊断肝脂肪变性。

因此，需要开发一种诊断方法，其给出患者肝脂肪变性程度的良好预测值，并且足够可靠到减少肝活检的需求。此方法对于患有涉及肝脂肪变性的疾病的患者或者对于已经作出肝纤维化或坏死性炎症损伤的阳性诊断测试的患者来说，是特别有利的，以使得治疗适应于患者的确切疾病。

发明内容