[发明专利]反应方法

权利要求书

1.一种进行多步反应的方法，所述方法包括：

1)在反应容器中添加一种或多种第一试剂，所述反应容器包括能够容纳试剂的上部腔室，该上部腔室与限制试剂流动的下部腔室连通，

2)使所述反应容器承受离心力，以驱动所述一种或多种第一试剂进入下部腔室中；

3)在该第一腔室中添加另外试剂，并关闭所述腔室；

4)使上部腔室或下部腔室中至少之一经受使所述一种或多种第一试剂或所述另外试剂分别参与第一反应或达到所需反应条件的条件；

5)使所述反应容器承受离心力，以驱动所述另外试剂进入下部腔室中，并使其可以与下部腔室中的内容物相互作用；

其中至少步骤(2)～(5)是自动进行的。

2.依照权利要求1的方法，其中所述反应容器的所述下部腔室是毛细管。

3.依照权利要求1或2的方法，其中在权利要求1中，使下部腔室经受使所述一种或多种第一试剂参与第一反应或达到所需反应条件的条件。

4.依照权利要求1～3中任一项的方法，其中在步骤(3)中通过适当形状的盖子关闭反应容器。

5.依照前述权利要求中任一项的方法，其中所述一种或多种第一试剂包括PCR反应混合物，以及在步骤(4)中，使所述试剂经受热循环。

6.依照权利要求4的方法，其中热循环是通过使电流通过导电聚合物来实现的，所述导电聚合物构成上部腔室或者下部腔室或与上部腔室或下部腔室相邻。

7.依照权利要求5或6的方法，其中所述另外试剂包括进行第二PCR反应所需的一种或多种另外试剂。

8.依照权利要求5或6的方法，其中所述另外试剂包括用于检测扩增核酸的信号系统。

9.依照权利要求8的方法，其中该信号系统包括在扩增DNA的存在下产生荧光、化学发光或生物发光信号的试剂。

10.依照权利要求9的方法，其中该信号系统可以在不打开反应容器的情况下检测到。

11.依照权利要求9或10的方法，其中该信号系统包括荧光标记探针和DNA结合剂的组合，所述荧光标记探针与如果DNA已经在PCR反应过程中被扩增则会在该DNA中发现的序列特异性结合，所述DNA结合剂能够通过吸收由该探针发出的荧光能量或通过为探针提供荧光能量而与该荧光标记探针相互作用。

12.依照权利要求11的方法，其中该DNA结合剂是与DNA结合时不会释放荧光的结合剂。

13.依照权利要求1～4中任一项的方法，其中该一种或多种第一试剂或另外试剂包括进行标的物逆转录酶方法所需的试剂，所述一种或多种第一试剂或另外试剂中的另一则包括可由所述标的物逆转录酶方法得到的cDNA扩增所需的PCR试剂。

14.依照权利要求5的方法，其中另外试剂是能够降解该扩增反应产物的试剂。

15.依照权利要求1～4中任一项的方法，其中所述一种或多种第一试剂包括用于进行扩增反应所需的一些试剂，以及其中所述另外试剂包括所述扩增反应必需的、不包含在所述一种或多种第一试剂中的试剂，以及其中，在步骤(4)中，将所述一种或多种第一试剂达到便于发生适当扩增的温度条件。

16.依照前述权利要求中任一项的方法，其中在添加之前，将该一种或多种第一试剂和/或该另外试剂提供在位于开向下部腔室的开口之上的上部腔室内部的筒体或易碎容器中。

17.依照权利要求16的方法，其中通过打破所述筒体或易碎容器，将该一种或多种第一试剂和/或该另外试剂添加到反应容器中。

18.依照权利要求17的方法，其中使用刺棒或刀具打破所述筒体或易碎容器。