[发明专利]鉴别癌症/异型细胞和粒子团的方法及细胞分析仪

说明书

技术领域：

本发明涉及一种从采自活体的细胞团(标本)中鉴别癌/异型细胞的方法及其鉴别所需粒子团的鉴别方法。

背景技术：

作为癌症、特别是宫颈癌的早期发现的鉴别方法，在体检中细胞诊断学得到有效利用。

在此，宫颈癌的细胞诊断是用绵签和刮刀等擦过宫颈表面，立即将刮取的细胞涂在载玻片上作成标本，进行显微镜观察。显微镜下的细胞形态观察由细胞化验员对每个标本逐一诊断，在精度和处理速度上有待改进。

近年来，自动检查细胞标本、判断有无癌细胞的仪器应运而生。

这种自动诊断仪器将含有宫颈癌细胞的标本涂在载玻片上制作涂抹标本，用巴氏(Papanicolaou)染色法对标本的细胞核和细胞质染色，从处理标本细胞形态图片的形态信息中判断有无癌细胞。但是，这种自动细胞诊断仪器的性能为正常细胞排除率25％，处理速度为8～10个标本/小时。这种精度和处理速度对于在体检等现场负责判断有无癌症的人来说是远远不够的。

另一方面，有一种细胞诊断方法不是靠细胞形态观察，而是通过检出对癌细胞有特异性的标记来判断有无癌细胞的。

比如，专利文献1上提出的方法是用宫颈癌相关的蛋白质及识别它的抗体作为对宫颈癌及其癌前状态有特异性的标记物进行检测的免疫测定技术。

专利文献2不仅针对宫颈部位的涂抹标本，而且是针对分散在各处的细胞团的标本提出了一种肿瘤细胞及其前驱细胞的自动检测方法。即，用对标记物有特异反应的抗体或对核酸探针作了荧光标识的试剂对癌细胞中2种以上的标记物进行检测，自动检测有无试剂与上述标记物结合而发出荧光信号，以此检查有无癌细胞。

然而，运用这种基于标记物的方法在癌/异型细胞的鉴别上其操作的简便性和测定的精度、速度等也尚不十分令人满意。

专利文献1：专利发表2001-500609号公报

专利文献2：专利公开2002-296274号公报

发明内容：

发明要解决的课题

本发明考虑到上述情况，提供一种通过对用流式细胞技术测得的光学信号波形进行分析，更高效、精确地鉴别癌/异型细胞的方法以及鉴别癌/异型细胞所需要的粒子团的鉴别方法。

解决课题的手段

本发明提供一种方法，即用流式细胞仪测量多个细胞，针对各细胞取得散射光信号，分析各散射光信号波形，以此计算出一个以上的特征参数，根据该特征参数从上述多个细胞中鉴别出癌/异型细胞。在此，所谓散射光信号至少包含前向和侧向散射光信号其中之一。

细胞可以是宫颈部位的细胞。

特征参数也可以反映散射光信号波形的复杂性。

也可以将两个或两个以上的特征参数结合起来，从而将癌/异型细胞从多个细胞中鉴别出来。

特征参数之一可以是信号的幅宽。

特征参数也可以是鉴别癌/异型细胞和白细胞团的参数。

特征参数也可以是鉴别癌/异型细胞和正常扁平上皮细胞的参数。

特征参数也可以是鉴别癌/异型细胞和正常扁平上皮细胞团的参数。

从另一个角度来看，本发明提供了一种粒子团鉴别方法，包括用流式细胞仪测量多个粒子；就各粒子取得散射光信号；分析各散射光信号波形，以此计算出一个以上的特征参数；用该特征参数从上述多个粒子中鉴别出粒子团。

特征参数最好是标准二阶矩、差分积分值/峰值中的至少一个。

发明效果

因为是根据从流式细胞仪取得的细胞散射光信号波形计算一个以上特征参数，再用该特征参数鉴别，故比显微镜观察的方法和仅凭标记检测的方法能够更简便、更有效、更精确地对大量细胞进行癌/异型细胞的鉴别。

在下述本发明的实施方式中的流式细胞仪不仅能检测散射光信号，还能检测荧光信号。也可以将上述仅用荧光标记的标识物检测的方法与本发明方法组合起来使用，这样，可望通过本发明大大改善仅用荧光标记的标识物检测法所存在的上述测定精度问题。

附图说明：

[图1]为本发明使用的流式细胞仪光学系统的结构图。

[图2]为本发明使用的流式细胞仪控制系统的框图。

[图3]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。

[图4]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。

[图5]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。

[图6]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。

[图7]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。

[图8]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。

[图9]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。