[发明专利]规定部位发光量测定方法、规定部位发光量测定装置、表达量测定方法及测定装置有效
申请号: | 200680010592.9 | 申请日: | 2006-03-30 |
公开(公告)号: | CN101151378A | 公开(公告)日: | 2008-03-26 |
发明(设计)人: | 铃木浩文;大桥阳子;川崎健司;小岛清嗣;小山健一;吉川晃彦 | 申请(专利权)人: | 奥林巴斯株式会社 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/00;G02B21/18;G02B21/36 |
代理公司: | 北京三友知识产权代理有限公司 | 代理人: | 黄纶伟 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 规定 部位 发光 测定 方法 装置 表达 | ||
1.一种规定部位发光量测定方法,通过测定来自导入了融合基因的活的样本的发光量,获得来自规定部位的发光量,所述融合基因融合了使发光蛋白质转移到样本内的所述规定部位的转移碱基排列和表达该发光蛋白质的发光关联基因,其特征在于,
所述融合基因除了所述转移碱基排列和所述发光关联基因之外,还融合了表达荧光蛋白质的荧光关联基因,
该规定部位发光量测定方法包括:
荧光图像摄像步骤,其对导入了该融合基因的样本的荧光图像进行拍摄;
判定步骤,其根据所述荧光图像摄像步骤所拍摄的荧光图像,判定规定部位是否局部存在发光蛋白质;以及
发光量测定步骤,其在所述判定步骤的判定结果是判定为局部存在的情况下,测定来自样本的发光量。
2.根据权利要求1所述的规定部位发光量测定方法,其特征在于,
当导入了所述融合基因的活的样本在摄像范围中存在多个的情况下,该规定部位发光量测定方法还包括:
发光图像摄像步骤,其对多个所述样本的发光图像进行拍摄;以及
选定步骤,其通过使所述荧光图像摄像步骤所拍摄的荧光图像和所述发光图像摄像步骤所拍摄的发光图像重合,从所述判定步骤的判定结果是判定为局部存在的样本中选定测定对象的样本,
所述荧光图像摄像步骤对多个所述样本的荧光图像进行拍摄,
所述判定步骤根据所述荧光图像,按照每个样本来判定规定部位是否局部存在发光蛋白质,
所述发光量测定步骤对来自所述选定步骤所选定的样本的发光量进行测定。
3.根据权利要求2所述的规定部位发光量测定方法,其特征在于,
通过重复执行所述荧光图像摄像步骤、所述判定步骤、所述发光图像摄像步骤、所述选定步骤以及所述发光量测定步骤,经时地获得来自样本内的规定部位的发光量。
4.根据权利要求1所述的规定部位发光量测定方法,其特征在于,
该规定部位发光量测定方法还包括发光分离步骤,该步骤按照发光色的不同分离来自所述样本的发光,
导入到所述样本中的融合基因存在多个,并预先制作成使按照所述转移碱基排列所转移的发光蛋白质的转移目的地部位、从所述发光蛋白质发出的发光的发光色、以及从所述荧光蛋白质发出的荧光的荧光色的组合分别不同,
所述判定步骤根据所述荧光图像,按照每个荧光色判定规定部位是否局部存在发光蛋白质,
在所述判定步骤的判定结果是判定为局部存在的情况下,所述发光量测定步骤从所述发光分离步骤所分离的多个发光中,指定来自该被判定为局部存在的部位的发光,测定所指定的发光的发光量。
5.根据权利要求1~4中任一项所述的规定部位发光量测定方法,其特征在于,
所述样本为试样、组织、细胞、个体中的任意一种。
6.根据权利要求3所述的规定部位发光量测定方法,其特征在于,
该规定部位发光量测定方法还包括ATP定量步骤,该步骤根据所述发光量测定步骤所测定的发光量,对所述选定步骤所选定的样本内规定部位中的ATP进行定量,
所述样本是细胞,所述规定部位是线粒体,所述转移碱基排列是线粒体转移信号,所述发光蛋白质是荧光素酶,所述荧光蛋白质是绿色荧光蛋白质,
除了所述荧光图像摄像步骤、所述判定步骤、所述发光图像摄像步骤、所述选定步骤以及所述发光量测定步骤以外,还重复执行所述ATP定量步骤,由此经时地对来自样本内的规定部位的ATP进行定量。
7.一种规定部位发光量测定装置,通过测定来自导入了融合基因的活的样本的发光量,获得来自规定部位的发光量,所述融合基因融合了使发光蛋白质转移到样本内的所述规定部位的转移碱基排列和表达该发光蛋白质的发光关联基因,其特征在于,
使用除了所述转移碱基排列和所述发光关联基因之外,还融合了表达荧光蛋白质的荧光关联基因的融合基因,
该规定部位发光量测定装置具有:
荧光图像摄像单元,其对导入了该融合基因的样本的荧光图像进行拍摄;
判定单元,其根据所述荧光图像摄像单元所拍摄的荧光图像,判定规定部位是否局部存在发光蛋白质;以及
发光量测定单元,其在所述判定单元的判定结果是判定为局部存在的情况下,测定来自样本的发光量。
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