[发明专利]抗体的改良方法

权利要求书

1.改良人抗体或人源化抗体以得到表达量和/或稳定性提高的抗体的方法，其特征在于：将人抗体或人源化抗体的可变区轻链，即VL链的、按照Kabat记数的第8位、12位、15位或18位的至少其中一个氨基酸置换为除脯氨酸或半胱氨酸之外的其它氨基酸。

2.权利要求1的方法，其特征在于：将位于VL链的8位、12位、15位或18位的至少一个脯氨酸、或15位的氨基酸置换为除脯氨酸或半胱氨酸之外的其它氨基酸。

3.权利要求1或2的方法，其中，置换后的各位置的氨基酸分别选自下述的任意一种氨基酸：

8位：Gly、Thr、Arg或Ser

12位：Ser、His、Val、Gly、Leu、Arg、Phe、Met或Glu

15位：Arg、Ser、Gly或Phe

18位：Arg、Ser、Phe、Ala、Trp、Leu或Gln

4.权利要求1-3中任一项的方法，其中，该VL链属于人Vκ1家族、人Vκ2家族或人Vκ3家族的其中之一。

5.权利要求1-4中任一项的方法，其中，属于人Vκ1家族的VL链在置换后的各位置的氨基酸分别选自下述任意一种氨基酸：

8位：Gly、Thr、Arg或Ser

15位：Arg或Ser

6.权利要求5的方法，其中，该属于人Vκ1家族的VL链在置换前的FR1具有来自GenBank检索号：No.X59315的DPK9的序列。

7.权利要求5或6中任一项的方法，其中，置换后的属于人Vκ1家族的VL链的FR1是选自SEQ ID No.2-7中的氨基酸序列的氨基酸序列。

8.权利要求1-4中任一项的方法，其中，属于人Vκ2家族的VL链在置换后的各位氨基酸分别选自下述任意一种氨基酸：

12位：Ser、His、Val、Gly、Leu、Arg、Phe、Met或Glu

15位：Arg

18位：Arg、Ser、Phe、Ala、Trp、Leu或Gln

9.权利要求8的方法，其中，属于该人Vκ2家族的VL链在置换前的FR1具有来自GenBank检索号No.X63403的DPK18的序列。

10.权利要求8或9中任一项的方法，其中，置换后的属于人Vκ2家族的VL链的FR1是选自SEQ ID No.9-25的氨基酸序列的氨基酸序列。

11.权利要求1-4中任一项的方法，其中，属于人Vκ3家族的VL链在置换后的各位氨基酸选自下述任意一种氨基酸：

15位：Arg、Ser、Gly或Phe

12.权利要求11的方法，其中，属于该人Vκ3家族的VL链在置换前的FR1具有来自GenBank检索号No.X59315的DPK22的序列。

13.权利要求11或12中任一项的方法，其中，置换后的属于人Vκ3家族的VL链的FR1是选自SEQ ID No.27-30的氨基酸序列的氨基酸序列。

14.权利要求1-13中任一项的方法，其中，该抗体是完全抗体、或者Fab、Fab’、F(ab’)₂、scAb、scFv、双抗体或scFv-Fc的抗体片段、或者它们与其它蛋白的融合抗体或融合抗体片段、结合有低分子标记物的抗体或抗体片段、被高分子修饰物修饰的抗体或抗体片段。

15.权利要求1-14中任一项的方法，该方法是通过基因重组技术进行氨基酸置换。

16.人抗体或人源化抗体、或者人抗体片段或人源化抗体片段，它们由权利要求1-14中任一项的方法得到，表达量和/或稳定性提高。