[发明专利]化学治疗应答者的确定

说明书

发明领域

本发明涉及一种检测包含人肺癌细胞的生物样品是否对表皮生长因子受体抑制剂和化学治疗剂的组合敏感的方法，所述方法通过测定磷酸化的AKT蛋白和/或磷酸化的MAPK蛋白在生物样品中的过量表达而进行。本发明还涉及获得候选药剂或者选择在患者中用于抑制肺癌进展的组合物的方法，在所述方法中使用磷酸化的Akt蛋白和/或磷酸化的MAPK蛋白。

发明背景

由erbB1基因编码的EGFR已经以因果方式涉及人类恶性肿瘤。特别地，已经在乳腺癌、膀胱癌、肺癌、头癌、颈癌和胃癌以及成胶质细胞瘤中观察到增加的EGFR表达。表皮生长因子受体(EGFR)，一种170-kD的糖蛋白，由N端细胞外结构域、疏水跨膜结构域和包含激酶结构域的C端细胞内区域组成。EGFR配体-诱导的二聚体化作用激活内部的RTK结构域(一种Src同源结构域1，SH1)，这引起在细胞质结构域非催化尾的6个特异EGFR酪氨酸残基的自动磷酸化作用。

癌细胞中EGFR激活的细胞作用包括增加的增殖、促进细胞运动、黏附、侵入、血管发生、以及通过抑制细胞程序性死亡而增加的细胞存活。激活的EGFR通过刺激促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联反应而诱导肿瘤细胞增殖。一旦配体结合到EGFR上时，SOS鸟嘌呤核苷酸交换因子就通过Grb2连接蛋白补充到质膜上，其在小G蛋白Ras上刺激GTP交换成GDP，随后激活由Raf、MEK和ERK组成的MAPK级联反应。激活的ERKs(pMAPK，pERK1/2)又磷酸化并且激活转录因子，诸如ELK-1或c-Myc，从而促进细胞生长。

多种生长因子途径通过多种激酶的激活而促进NSCLC细胞的发展和存活。EGFR还经由通过磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/Akt途径和STAT途径进行信号传导而增强癌细胞的存活。Akt还通过其它生长因子激活，包括胰岛素生长因子-1、碱性成纤维细胞生长因子以及白细胞介素3和6。Akt的3个同种型1-3都是以相似的方式在活化结构域的残基T308和COOH-末端结构域的S473被磷酸化(pAKT)。

Erlotinib(是一种有效的表皮生长因子受体(HER1/EGFR)酪氨酸-激酶抑制剂(TKI)，当用作单独的药剂时，其为先前化学治疗失败的非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer，NSCLC)患者提供生存益处(WO01/34574)。的功效在许多试验中进行研究。它的化学名为N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺。

TALENT试验是在一线NSCLC患者中进行的安慰剂-对照的III期研究，所述患者接受吉西他滨和顺铂(这种同时的化学治疗是非美国护理标准(non-US standard of care)的)组合erlotinib(150mg/天)或者组合安慰剂。初级目的是存活持续时间，次级目的是发展时间、反应率；反应的持续时间；药物动力学和药效参数，以及生活质量。还评估了HER1/EGFR和HER2表达率。进行了标准的安全性分析。TALENT试验总的结果是阴性的。对于初级和次级目的，与单独的吉西他滨和顺铂相比，erlotinib加化学疗法(吉西他滨和顺铂)不存在明显的益处(Gatzemeier，U.，等.，Proc Am Soc Clin Oncol 23(2004)617(Abstract7010))。在使用erlotinib加卡铂和紫杉醇的基于美国的TRIBUTE研究中观察到相同的结果(Herbst，R.S.，等.，J Clin Oncol(2004)ASCO AnnualMeeting Proceedings.Post-Meeting Edition；22(July 15 Suppl.)(Abstract7011))。将单独的药剂erlotinib作为二线或三线治疗剂用于非小细胞肺癌(NSCLC)(BR.21；NCIC/OSIP)的随机化安慰剂-对照的III期研究发现，与安慰剂(4.7个月)相比，使用erlotinib在存活上有统计学显著的提高(6.7个月)。