[发明专利]抗纤连蛋白ED－B和白细胞介素12的抗体L19的融合蛋白

权利要求书

1. 一种包含具有第一和第二亚基的异二聚体蛋白的缀合物，其中所述的第一和第二亚基各自缀合于单链Fv(scFv)，并且其中所述的异二聚体蛋白含有治疗或诊断剂。

2. 根据权利要求1的缀合物，其中所述的第一亚基缀合于scFv作为第一融合蛋白，而所述的第二亚基缀合于scFv作为第二融合蛋白。

3. 根据权利要求1或权利要求2的缀合物，其中所述的异二聚体蛋白的第一和第二亚基通过二硫键共价连接。

4. 根据权利要求1至3的任一项的缀合物，其中所述的异二聚体蛋白是IL12。

5. 根据前述任一权利要求的缀合物，其中所述的缀合物具有250,000或更低的分子量。

6. 根据权利要求5的缀合物，其中所述的缀合物具有的分子量为150,000或更小。

7. 根据权利要求6的缀合物，其中所述的缀合物具有的分子量为120,000或更小。

8. 根据前述任一权利要求的缀合物，其中所述的两个scFv是相同的。

9. 根据权利要求1至8的缀合物，包含缀合于并位于两个scFv之间的人的IL12异二聚体；其中

IL12异二聚体具有第一和第二亚基；

所述的第一亚基缀合于scFv作为第一融合蛋白；而

所述的第二亚基缀合于scFv作为第二融合蛋白。

10. 根据权利要求9的缀合物，其中所述的第一融合蛋白具有如SRQ ID NO：1所示的氨基酸序列。

11. 根据权利要求9或权利要求10的缀合物，其中所述的第二融合蛋白具有如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。

12. 根据权利要求1至9的任一项的缀合物，其中一个或两个scFv特异地结合于与赘生性生长和/或血管生成相关的胞外基质成分。

13. 根据权利要求12的缀合物，其中该成分是纤连蛋白ED-B。

14. 根据权利要求13的缀合物，其中该scFv是具有VH结构域和VL结构域的scFv(L19)，所述VH结构域包含SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：26和SEQ ID NO：27的氨基酸序列，所述VL结构域包含SEQ ID NO：28、SEQ ID NO NO：29和SEQ ID NO：30的氨基酸序列。

15. 根据权利要求14的缀合物，其中scFv是具有如SEQ ID NO：5所示的氨基酸序列的scFv(L19)。

16. 根据权利要求12的缀合物，其中该成分是生腱蛋白-C同种型。

17. 根据权利要求16的缀合物，其中scFv是具有如SEQ ID NO：21所示的氨基酸序列的scFv(TN11)。

18. 生产根据权利要求4至17的任一项的缀合物的方法，包括：

表达第一和第二融合蛋白质；和

将第一和第二亚基偶联以形成异二聚体蛋白。

19. 根据权利要求18的方法，包括在含有编码两种融合蛋白的核酸的细胞内表达第一和第二融合蛋白。

20. 根据权利要求18或权利要求19的方法，更进一步包括将所述的缀合物配制成药物组合物。

21. 一种组合物，包含

含有编码融合蛋白的核苷酸序列的第一核酸分子，其中该融合蛋白包含scFv和异二聚体蛋白的第一亚基；以及

含有编码融合蛋白的核苷酸序列的第二核酸分子，其中该融合蛋白包含scFv和异二聚体蛋白的第二亚基。

22. 根据权利要求21的组合物，其中scFv如权利要求12至17的任一项中所定义。

23. 根据权利要求21或权利要求22的组合物，其中所述的第一亚基是IL12p40亚基以及所述的第二亚基是IL12 p35亚基。

24. 根据权利要求21、22或23的任一项的组合物，其中所述的第一和第二核酸分子是第一和第二载体。

25. 一种含有如权利要求21至24的任一项中所定义的第一和第二核酸分子的宿主细胞。