[发明专利]疫苗

说明书

本发明提供了改善的疫苗组合物、生产它们的方法和它们在药物中的用途。特别地，本发明提供了佐剂化的疫苗组合物，其包含可以改善抗原的I类MHC呈递的试剂，和与佐剂配制的抗原。

开发需要细胞应答的优势诱导的疫苗仍然是一种挑战。因为细胞免疫反应的主要效应细胞CD8+T细胞识别在病原体感染的细胞中合成的抗原，因此成功的疫苗接种需要免疫原性抗原在接种者的细胞中合成。这可以使用活的减毒疫苗实现，然而它们也存在显著的局限性。首先，当接种者被免疫抑制时，或当病原体本身(例如，人类免疫缺陷病毒)可以诱导免疫抑制时，存在着感染的风险。第二，某些病原体很难或不可能在细胞培养物中生长(例如，C型肝炎病毒)。其他现有的疫苗，例如钝化的完整细胞疫苗或白矾佐剂化的重组蛋白亚基疫苗明显地是CD8应答的不良诱导物。

由于这些原因，开发了替代性的方法：活的载体化疫苗、质粒DNA疫苗、合成肽或特殊的佐剂。活的载体化疫苗在诱导强细胞反应方面是很好的，但是针对所述载体的先存的(例如，腺病毒)或疫苗诱导的免疫性可能妨害额外的疫苗剂量的效力(Casimiro et al，JOURNAL OFVIROLOGY，June 2003，p.6305-6313)。质粒DNA疫苗也可以诱导细胞反应(Casimiro et al，JOURNAL OF VIROLOGY，June 2003，p.6305-6313)，但是它在人类中仍然是弱的(Mc Conkey et al，NatureMedicine 9，729-735，2003)，抗体反应非常不好。此外，当前正在临床试验中评估合成肽(Khong et al，J Immunother 2004；27：472-477)，但是这种编码有限数量T细胞表位的疫苗的效力可能由于疫苗逃避突变体的出现、或由于HLA匹配患者的最初选择的必要性而被妨碍。

基于使用非存活载体的抗原递送，也已经描述了旨在改善I类MHC呈递的备选的方法。某些非存活载体来自细菌毒素，例如AnthraxLFn毒素(Ballard et al(1996)PNAS USA 93 pp12531-12534)、B.pertussis腺苷酸环化酶毒素(Fayolle et al(1996)J.Immunology 156 p 4697-4706)、Pseudomonas外毒素A(Donnelly et alPNAS USA(1993)90pp3530-3534)或E.coli热不稳定毒素(Partidos et al.Immunology(1996)89pp 483-487)。

疫苗抗原和递送系统的局限性表明对新疫苗组合物的探寻是正当的。本发明人已经发现，在包含来自细菌毒素的非存活载体的组合物中包括佐剂，对于产生的免疫反应、特别是CD8特异性反应具有有益效果。认为的是，这种有益效果是由于佐剂所给予的免疫反应活化以及靶向MHCl途径的试剂所提供的抗原正确递送的组合所致，而不是由于这种试剂提供的额外的佐剂效果。使用与佐剂一同施用的含有LTB-亚基和抗原的疫苗组合物的早先研究没有显示对免疫反应强度的协同效应(McCluskie et al.2000 Mol Medicine 6pp 867-877；McCluskie etal(2001)Vaccine 19pp 3759-3768)。

因而，本发明提供了一种疫苗组合物，其包含与抗原复合的、E.coli热不稳定毒素(heat labile toxin)的B-亚基或其具有等于或大于90％同源性的衍生物，并进一步包含佐剂。

在进一步的实施方式中，E.coli热不稳定毒素的B-亚基或其具有等于或大于90％同源性的衍生物能够结合G_M1受体。在进一步的实施方式中，E.coli热不稳定毒素的B-亚基或其具有等于或大于90％同源性的衍生物能够将抗原靶向至I类MHC途径，如小节2.1中描述的方法所测量的。

在此使用的术语“疫苗组合物”被定义为用于引发针对该组合物内的抗原的免疫反应、以保护或治疗有机体对抗疾病的组合物。

在本发明的上下文中，词语毒素意图指已经被解毒从而对人类不再有毒的毒素，或在人类中基本上缺乏毒性活性的毒素亚基或其片段。

基于解毒的毒素的优选的非存活载体是来自E.coli不稳定毒素(LT)的B亚基。在优选的实施方式中，所述非存活载体是来自I型E.coli不稳定毒素(LTI)的B亚基。