[发明专利]新的细胞组合物及其制备方法

说明书

相关申请的交叉参考

本申请是美国专利申请系列号11/110,879(2005年04月21日提交)的继续申请，该申请以其全部内容引入本文作为参考。 

技术领域

本发明涉及新的细胞(例如，肝细胞，等等)组合物及其制备和使用方法。特别地，本发明涉及加工这些细胞的制品以使它们能够重复冷冻保存和解冻、同时保持基本存活力的方法。本发明还涉及已经被重复地冷冻保存和解冻的细胞(例如，肝细胞)的制品。 

背景技术

肝细胞是实质肝细胞，而且占肝胞质团的60-80％。肝细胞在外源和内源物质的解毒、修饰和分泌中起关键作用(Ponsoda，X.等.(2004)″Drug Metabolism By Cultured Human Hepatocytes：How FarAre We From The In Vivo Reality？″Altern.Lab Anim.32(2)：101-110)。肝细胞的一种解毒功能是把氨变成尿素后排出。它们在蛋白质合成和贮存、碳水化合物转化和胆固醇、胆汁盐和磷脂的合成中也很重要(Postic，C.等.(2004)″Role Of The Liver In The Control Of CarbohydrateAnd Lipid Homeostasis，″Diabetes Metab.30(5)：398-408)。肝细胞是体内唯一产生白蛋白、纤维蛋白原和凝血因子的凝血酶原基团的细胞。它是脂蛋白、血浆铜蓝蛋白、转铁蛋白和糖蛋白合成的主要位点。肝细胞产生它们自己的结构蛋白质和胞内酶。肝细胞也是维生素B12和铁的重要贮藏库。 

由于这些特征，分离的和培养的肝细胞已经成为用于肝功能研究的非常有吸引力的模型体系(Chesne，C.等.(1993)″Viability And Function In Primary Culture Of Adult Hepatocytes From Various AnimalSpecies And Human Beings After Cryopreservation，″Hepatology18(2)：406-414；Guillouzo，A.等.(1986)″Isolated and CulturedHepatocytes，″Paris：les Editions INSERM and London：John LibbeyEurotext)；Ponsoda.X.等.(2004)″Drug Metabolism By Cultured HumanHepatocytes：How Far Are We From The In Vivo Reality？″Altern.LabAnim.32(2)：101-110；Gomez-Lechon，M.J.等.(2004)″HumanHepatocytes In Primary Culture：The Choice To Investigate DrugMetabolism In Man，″Curr.Drug Metab.5(5)：443-462；Lemaigre，F.等.(2004)″Liver Development Update：New Embryo Models，Cell LineageControl，And Morphogenesis，″Curr Opin Genet Dev.14(5)：582-590；Nanji，A.A.(2004)″Animal Models Of Nonalcoholic Fatty Liver DiseaseAnd Steatohepatitis，″Clin Liver Dis.8(3)：559-574；Hewitt，N.J.等.(2004)Cryopreserved Rat，Dog And Monkey Hepatocytes：Measurement OfDrug Metabolizing Enzymes In Suspensions And Cultures.″Hum ExpToxicol.23(6)：307-316)。