[发明专利]纯化抗Aβ抗体的方法

权利要求书

1.从包括具有Fc区Aβ结合蛋白和一种或多种杂质的源液中将所 述蛋白纯化的方法，其包括步骤：

将所述Aβ结合蛋白吸附到Fc结合剂上；

用含有二价阳离子盐的缓冲溶液洗涤所述Fc结合剂；和从洗脱溶 液中的所述Fc结合剂回收所述蛋白。

2.权利要求1的方法，其中所述一种或多种杂质选自：内含子连 读变异体种类(IRT)，二硫键缺失类(UDB)和低分子量种类(LMW)。

3.权利要求2的方法，其中所述一种或多种杂质是IRT。

4.权利要求1的方法，其中所述Aβ结合蛋白是抗体。

5.权利要求4的方法，其中所述抗体选自：抗体融合，鼠抗体， 嵌合抗体，人源化抗体和人抗体。

6.权利要求1的方法，其中所述Aβ结合蛋白是人源化抗Aβ抗体。

7.权利要求6的方法，其中所述人源化抗Aβ抗体选自：3D6， 10D5，12A11和12B4。

8.权利要求1的方法，其中所述具有Fc区的Aβ结合蛋白是重组 产生的。

9.权利要求1的方法，其中所述具有Fc区的Aβ结合蛋白是在中 国仓鼠卵巢(CHO)细胞中重组产生的。

10.权利要求1的方法，其中所述Fc结合剂包括A蛋白和G蛋白 的一种或多种。

11.权利要求1的方法，其中所述Fc结合剂被固定在固相上。

12.权利要求11的方法，其中所述固相包括珠，凝胶，树脂和颗 粒的一种或多种。

13.权利要求1的方法，其中所述二价阳离子盐包括离液序列高 的盐。

14.权利要求1的方法，其中所述二价阳离子盐选自：CaCl₂，NiCl₂， MgCl₂及其混合物。

15.权利要求1的方法，其中所述含有二价阳离子盐的缓冲溶液 的pH值在约4至约8的范围内。

16.权利要求1的方法，其中所述含有二价阳离子盐的缓冲溶液 的pH值在约4.5至约7.5的范围内。

17.权利要求1的方法，其中所述缓冲溶液的二价阳离子盐浓度 在约0.1M至约5M的范围内。

18.权利要求17的方法，其中所述缓冲溶液的二价阳离子盐浓度 在约0.5M至约3M的范围内。

19.权利要求1的方法，其中所述含有二价阳离子盐的缓冲溶液 包括至少约0.6M的CaCl₂。

20.权利要求1的方法，其中所述含有二价阳离子盐的缓冲溶液 包括至少约2M的MgCl₂。

21.权利要求1的方法，其中所述含有二价阳离子盐的缓冲溶液 包括至少约2M的CaCl₂。

22.权利要求1的方法，其中将所述Aβ结合蛋白吸附到Fc结合 剂上和洗涤所述Fc结合剂的步骤在约2℃至约24℃的温度范围内进 行。

23.权利要求1的方法，其中所述一种或多种杂质包括宿主细胞 蛋白，宿主细胞DNA，细胞培养物蛋白及其混合物的一种或多种。

24.权利要求1的方法，其中所述一种或多种杂质包括Fc区的非 所需种类的蛋白。

25.权利要求1的方法，其中所述非所需种类的Aβ结合蛋白包括 一种或多种具有内含子连读序列的抗体链或其片段，一种或多种具有 不正确二硫键的抗体链或其片段，半抗体或其片段，轻链二聚体或其 片段和重链二聚体或其片段。