[发明专利]分析脂质体的方法

说明书

本发明涉及定性和/或定量测定测试介质，优选液体测试介质中脂质囊泡或脂质体膜的形态完整性和完好性的方法。

发明背景

术语“脂质体”起源于希腊语，其表示“脂肪微粒(fatty corpuscle)”。脂质体是无法用光学显微镜看到的非常小的中空球体，也称为囊泡。这些囊泡由围绕水性核心的一个或多个脂双层构成。在化妆品或药物中，脂质体是作为活性成分运输系统的首选。此外，一些情况也利用了脂质体的稳定作用。另外，因为囊泡诸组分的化妆品和药学相关特性，也常使用脂质体本身。

文献中首次报道的脂质体由磷脂构成(A D Bangham，Adv.Lipid Res.1，65-104，1963)。即使如今，大多数脂质体也由磷脂构成，例如纳米体(nanosome)。然而，脂质体也包括特殊的脂质体类型，例如神经酰胺脂质体(cerasome)(神经酰胺)、鞘脂体(sphingosome)(鞘脂)和非离子型表面活性剂脂质体(niosome)(非离子表面活性剂)-它们均是“脂肪微粒”；脂质中的变化意味着囊泡膜具有不同特性。

脂质体一般从卵磷脂制得；卵磷脂通常从大豆植物或鸡蛋获得。术语“卵磷脂”被用于描述磷脂(PL)、油及其它亲脂性成分的混合物，也可以只用于磷脂组分本身。在一些情况中，术语“卵磷脂”表示特定的磷脂，即磷脂酰胆碱(PC)。所有磷脂由亲脂性部分(脂肪酸)和亲水性头基团构成，其中脂肪酸和头基团经间隔基团，一般是甘油而酯化。

由磷脂产生的脂质体的稳定性取决于它们的磷脂酰胆碱含量及其脂肪酸组成。在水性制剂和凝胶中，磷脂酰胆碱含量高(＞70％)产生稳定的脂质体。为产生囊泡，加入水合磷脂酰胆碱和/或胆固醇可提高稳定性。

在化妆品和制药工业中，为增加脂质体所含活性物质的效力和稳定性，将加载了活性成分的脂质体掺入制品。许多不同的脂质体制品或制剂可以例如喷剂、凝胶、乳剂、洗剂、乳膏、油膏等形式商品化购得。特别是在药物制剂方面，稳定性和完整性的问题，即所制备制剂的形态完整性和囊泡完好性问题一再出现。在这方面，讨论中至关重要的一点是制品的各组分与脂质囊泡可能的相互作用。

已知乳化剂和表面活性剂能增溶脂质囊泡或脂质体。增溶作用干扰了囊泡的膜结构，再也不能确保膜的形态完整性，从而严重影响或者甚至破坏了囊泡包裹活性成分的的优点。例如，J T Simonnet的一篇文章(J T Simonnet，Cosmetics&Toiletries Magazine 109，45-52，1994)描述了水溶液中各种表面活性剂与脂质体之间的这种相互作用。

所引用的Simonnet文章中述及了各种增稠剂(生物聚合物)的保护性作用。制剂的各种功能组分可影响稳定性，因而不但可从负面而且可从正面影响脂质囊泡/脂质体的完整性。

随着对高品质化妆品和药物制剂的需求不断增加，研究和评估脂质囊泡/脂质体与制剂诸组分的积极和/或消极相互作用的重要性与日俱增。对于化妆品和药物制剂的效力和效率，开发和建立能分析化妆品或药物制剂中脂质囊泡/脂质体的稳定性和完整性，即形态完整性和完好性的分析方法至关重要。

然而，根据现有技术，定量测定化妆品或药物制剂中脂质囊泡/脂质体的稳定性和完整性，或形态完整性和完好性是不可能的或基本上是不能令人满意的。

在这方面，可用的分析方法，例如电子显微术(EM)、静态和动态光散射实验(SLS，DLS)和不对称场流分级法(AFFF)应用有限。

利用EM检验化妆品和药物制剂的冷冻样品，就可以检测脂质囊泡/脂质体并评估成像囊泡的结构(形态完整性)和大小(在理想情况下)，但利用该方法不能定量测定制品中未破坏和完好的脂质囊泡/脂质体的含量或分数。该方法的另一主要缺点在于其工艺和设备昂贵。此外，EM结果的应用十分依赖于研究人员的实验和解读经验。

化妆品或医药工业采用SLS和DLS实验，例如光子相关光谱(PCS)来评估脂质囊泡/脂质体的大小和大小分布。这些方法对于脂质囊泡/脂质体的产品开发和质量控制至关重要。然而，一般而言，检测的是非常稀的脂质囊泡/脂质体乳剂，而不是正常使用的制品。

在SLS和DLS方法中，必须高度稀释待检测的溶液，因为较大囊泡的存在，例如乳膏剂的脂肪滴会强烈影响和歪曲光散射实验，这些方法不适于定量和定性地检测化妆品或药物制剂中脂质囊泡/脂质体的形态完整性和完好性。