[发明专利]原位热诱发的抗原修复及染色设备和方法有效
申请号: | 200680026673.8 | 申请日: | 2006-05-24 |
公开(公告)号: | CN101228429A | 公开(公告)日: | 2008-07-23 |
发明(设计)人: | 利·H·安格罗斯;托马斯·L·拜尔斯 | 申请(专利权)人: | 利·H·安格罗斯;托马斯·L·拜尔斯 |
主分类号: | G01N21/00 | 分类号: | G01N21/00;G01N33/543 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 曾祥夌;赵辛 |
地址: | 美国俄克*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 原位 诱发 抗原 修复 染色 设备 方法 | ||
背景
本发明涉及处理显微镜载玻片上的试样的领域,试样包括分析基质,更具体地说,涉及热诱发的抗原修复及染色(antigen recovery andstaining)的领域。
在解剖病理学实验(例如,组织学、细胞学)中,己知晓可对生物标本执行一些免疫组织化学程序,这里称为IHC化验,包括例如甲醛固定石蜡包埋组织和细胞的制备。本领域中还使用若干IHC抗体(abs),如雌性激素受主abs、孕酮受主abs、增生abs如Ki-67,其在应用抗体以标记细胞结构(抗原)之前,需要使用高温暴露技术(即抗原恢复(antigen retrieval),高温抗原决定部位修复和抗原暴露)。
本领域中存在若干己知的程序用于″暴露″抗原,这种抗原由于甲醛固定而导致″被隐藏起来″。本领域中己知的程序包括在水溶液(例如水)中处理生物标本,这种水溶液可包括缓冲剂(例如柠檬酸盐、EDTA、尿素等等),以及洗涤剂或表面活性剂(例如Brij35、Tween、SDS、NP-40和Igepal)。这些己知的配方被加热至60℃至大约120℃的温度。这些加热的配方与生物标本接触达各种时间量(例如,大约10分钟至大约90分钟),从而导致″隐藏的″抗原变成″暴露的″,使得IHC化验中所使用的抗体可附接在其与该生物标本相关联的相应的抗原上。
己知的用于执行加热抗原恢复溶液和生物标本的设备类型包括水浴器、蒸汽机、高压锅、高压釜、微波加热炉和对流炉。因为水在标准大气压下,于100℃沸腾,所以在蒸发的热损失抑制溶液达到更高的温度之前,抗原恢复溶液即使在存在其它化学成分的条件下,也只能够达到大约98℃至100℃的温度。高压锅和高压釜通过允许溶液加压而克服这个限制,从而可达到更高的温度,而没有引起加热流体的蒸发。因为有些抗体需要抗原恢复溶液处于超过100℃的温度,所以许多实验室必须使用高压锅来加热生物标本,使其抗原恢复溶液达到高达120℃的温度,如果不是这样,抗原将不会″被暴露″,防止了抗体结合到抗原上。
目前仍然需要一种设备能够为经受个性化的抗原恢复条件的单个载玻片产生高温压力条件,而不依赖于笨拙且笨重的设备例如高压锅和高压釜。
附图简介
图1是本发明的试剂带(试剂分配带)的平面图。
图2是图1试剂分配带沿着线1-1剖切的截面侧视图。
图3是沿着图2的线3-3剖切的截面图;
图4是图1试剂带的侧视图,其具有两个从中分离出的试剂模块。
图5是图1试剂带的底平面图,其中试剂模块通过瓦片连接器(tileconnector)重新附接在试剂带上。
图6是图5中所使用的瓦片连接器的顶平面图(A)、侧视图(B)和底平面图(C)。
图7是试剂带的底平面图,其中通过一对瓦片连接器重新连接两个试剂模块。
图8是试剂模块和瓦片连接器沿着线8-8剖切的截面图。
图9是本发明的另一试剂带的底座的顶平面图。
图10是图9试剂带的顶平面图,其中试剂容器设置在底座上。
图11是图10沿着线11-11剖切的截面侧视图。
图12是沿着线12-12剖切的截面图,其显示了试剂容器如何安装在图11的试剂带的底座上或从底座上除去。
图13是图11的试剂带的侧视图。
图14是图13的试剂带的前端视图。
图15是在已经除去″G″试剂容器,并且″H″试剂容器已经移动到前者″G″位置之后的图10试剂带的底平面图。
图16是在″G″试剂容器已经被″G-2″试剂容器更换之后的图10试剂带的底平面图。
图17是本发明的另一试剂带的顶平面图,其具有可交换的试剂模块。
图18是沿着图17的线18-18剖切的截面图;
图19是图17的试剂带的侧视图。
图20是图19的试剂带的前端视图。
图21是在已经除去试剂模块″G″之后的图17的试剂带的底平面图。
图22是在试剂模块″G″已经与试剂模块″G-2″交换了之后的图17的试剂带的底平面图。
图23是在试剂带插入到试剂带支撑器件之前,并且在显微镜载玻片设置在载玻片支撑元件上之前,本发明的反应模块(反应舱(reaction compartment)、载玻片、支撑元件和试剂带支撑器件)的截面侧视图。
图24A是图23的操作中的反应模块处于试剂分配阶段的截面侧视图。
图24B是图24A的反应模块的截面图。
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