[发明专利]不含腺病毒的重组腺病毒载体的快速生产

权利要求书

1. 一种重组腺病毒载体，其包括包含SEQ ID NO：1的第一种腺 病毒序列、启动子序列、MCS、转录终止子、包含SEQ ID NO：2的 第二种腺病毒序列、包含SEQ ID NO：4的第三种腺病毒序列、细菌复 制起点、和抗生素抗性基因，其中SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：4包 含允许在原核细胞中在重组腺病毒穿梭质粒和腺病毒主链质粒之间发 生同源重组的序列，以产生能够在包装细胞中产生不含RCA的Ad载 体的重组质粒。

2. 权利要求1的重组腺病毒载体，其中所述启动子选自巨细胞病 毒(CMV)主要立即早期启动子、猿猴病毒40(SV40)启动子、β肌 动蛋白启动子、清蛋白启动子、延伸因子1-α(EF1-α)启动子、PγK 启动子、MFG启动子和劳斯肉瘤病毒启动子。

3. 权利要求1的重组腺病毒载体，其中所述转录终止子是真核多 腺苷酸化信号，包括SV40多腺苷酸化信号。

4. 权利要求1的重组腺病毒载体，其中所述细菌复制起点可以来 源于pBR322复制起点。

5. 权利要求1的重组腺病毒载体，其中所述抗生素抗性基因选自 氨苄青霉素抗性基因、卡那霉素抗性基因、氯霉素抗性基因、四环素 抗性基因、潮霉素抗性基因、博来霉素抗性基因和zeocin抗性基因。

6. 权利要求1的重组腺病毒载体，其中所述原核细胞是大肠杆 菌。

7. 权利要求6的重组腺病毒载体，其中所述大肠杆菌是BJ5183。

8. 权利要求1的重组腺病毒载体，其中所述载体是pAdHigh。

9. 一种重组腺病毒载体，其包括包含来源于腺病毒血清型5序列 1-454的第一种腺病毒序列、启动子序列、多接头、转录终止子、包含 来源于腺病毒血清型5序列3511-5796的第二种腺病毒序列、包含序列 34931-35935的第三种腺病毒序列、细菌复制起点和抗生素抗性基因， 其中所述第二种和第三种腺病毒序列包含允许在原核细胞中在重组腺 病毒穿梭质粒和腺病毒主链质粒之间发生同源重组的序列。

10. 权利要求9的重组腺病毒载体，其中所述启动子选自巨细胞病 毒(CMV)主要立即早期启动子、猿猴病毒40(SV40)启动子、β肌 动蛋白启动子、清蛋白启动子、延伸因子1-α(EF1-α)启动子、PγK 启动子、MFG启动子、疱疹病毒启动子和劳斯肉瘤病毒启动子。

11. 权利要求9的重组腺病毒载体，其中所述转录终止子是真核多 腺苷酸化信号，包括SV40多腺苷酸化信号。

12. 权利要求9的重组腺病毒载体，其中所述细菌复制起点可以来 源于pBR322复制起点。

13. 权利要求9的重组腺病毒载体，其中所述抗生素抗性基因选自 氨苄青霉素抗性基因、卡那霉素抗性基因、氯霉素抗性基因、四环素 抗性基因、潮霉素抗性基因、博来霉素抗性基因和zeocin抗性基因。

14. 权利要求9的重组腺病毒载体，其中所述原核细胞是大肠杆 菌。

15. 权利要求14的重组腺病毒载体，其中所述大肠杆菌是BJ5183。

16. 权利要求9的重组腺病毒载体，其中所述载体是pAdHigh。