[发明专利]CD-33特异性的单链免疫毒素及其使用方法

说明书

技术领域

本发明通常涉及药物制剂，更具体地涉及含有能够与异常细胞表面抗原 结合并导致细胞死亡的活性成分的制剂，由此提供了能用于治疗具有所述异 常细胞的患者的制剂。

背景技术

急性骨髓白血病(AML)是成年人中最常见的急性白血病，在美国每年新 增约12,000个病例(Jemal等，CA Cance J Clin，54：8-29，2004)。约70-80％的 患者在高剂量化疗后能完全缓解，但复发频率高(Loewnberg等，N Engl Med，341：1051-1062，1999)。由于这种复发，使得所有患者的5年总存活率只 有22％。大于55岁的患者的预后情况更差(Appelbaum等，Hematology Am Soc Hematol Educ Program，62-86，2001)。此外，由于老年群体对标准化疗的 毒性的耐受性差，因此老年人的AML的治疗存在问题(Loewenberg等，N Engl J Med，341：1051-1062，1999)。

与AML最相关的抗原之一是CD33，为67kDa的糖蛋白类(Freeman 等，Blood，85：2005-2012，1995)。当该抗原与抗体结合时，该抗原介导了原发 性AML细胞的抗增殖作用和促凋亡作用(Mingari等，Immunol Rev， 181：260-268，2001)。这种作用是通过胞浆区(cytoplasmic domain)中含有的 ITIM-基序来介导的(Paul等，Blood，96：483-2000)。抗原CD33在骨髓分化 时表达，并存在于90％的AML患者的白血病母细胞中，但在正常的造血干 细胞和非造血组织中不表达(Dinndorf等，Blood，67：1048-1053，1986)。CD33 的表达谱及其快速内化的能力(Van der Velden等，Blood，97：3197-3204，2001) 使CD33成为基于抗体的AML治疗的合适的目标抗原。这种作用已在多种 方法中显示出来(Caron等，Cancer，73：1049-1056，1994；Wellhausen等，J Bio Regu；Homeost Agents，16：139-143，2002；Appelbaum等，Semin Hematol， 36：2-8，1999)。

在2000年，吉妥珠单抗奥唑米星(Gemtuzumab Ozogamicin)(GO CMA-676；Siever等，Blood，93：3678-3684，1999)被批准用于 AML患者的治疗。所述GO包括人源化抗-CD33IgG-抗体，其中，所述人源 化抗-CD33IgG-抗体与细胞毒性试剂加里刹霉素(calicheamicin)化学耦合 (Hamann等，Bioconjug Chem，13：47-58，2002)。

GO与CD33的结合导致了内化作用以及细胞内加里刹霉素的释放(van der Velden等，Blood，97：3197-3204，2001)。加里刹霉素结合在DNA的小沟上 并导致双链DNA的断裂(Zein等，Science，240：1198-1201，1988)。在II期临 床实验中，GO在复发的AML患者中产生了30％的总响应率。(Larson等， Leukemia，16：1627-1636，2002；Sievers等，Expert Opin Biol Ther，1：893-901， 2001)。然而，GO的使用引发了包括严重的肝静脉闭塞性疾病在内的肝中 毒、肺中毒和涉及呼吸系统和心血管系统的严重的过敏反应(Bross等，Clin Cancer Res，7：1490-1496，2001)。GO对源自CD33阴性的ALL抗原的细胞系 也具有抗原依赖的细胞毒活性(Jedema等，Leukemia，18：316-325，2004)。

部分地，本发明努力解决上述问题并提供用于治疗的化合物、制剂和方 法。

发明内容

公开了一种融合蛋白，该融合蛋白包括抗体片段部分和改性的毒性蛋白 部分。优选地，所述抗体片段部分和所述改性的毒性蛋白部分通过稳定的肽 键相连接。