[发明专利]细胞迁移测定

权利要求书

1.一种用于检测细胞迁移的物质组合物，该物质组合物含有：

(a)含有胶原凝胶或合成基质凝胶的固体层；

(b)接触所述固体层并含有第一细胞类型的第一细胞层；以及

(c)接种到所述第一细胞层上的第二迁移细胞类型。

2.根据权利要求1所述的物质组合物，其中所述细胞迁移为跨内皮迁移(TEM)。

3.根据权利要求1所述的物质组合物，其中所述固体层还含有荧光化合物。

4.根据权利要求1所述的物质组合物，其中所述固体层还含有化学引诱物。

5.根据权利要求4所述的物质组合物，其中所述化学引诱物在添加所述第一细胞层之前加入到所述胶原凝胶中。

6.根据权利要求4所述的物质组合物，其中所述化学引诱物由所述第一细胞层的所述第一细胞类型在细胞因子刺激后释放出来。

7.根据权利要求1所述的物质组合物，其中所述第一细胞层是汇合的。

8.根据权利要求1所述的物质组合物，其中所述第一细胞类型是人类脐静脉内皮细胞(HUVEC)。

9.根据权利要求1所述的物质组合物，其中所述第一细胞类型由细胞因子刺激。

10.根据权利要求1所述的物质组合物，其中所述第二细胞类型选自由单核细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、自然杀伤细胞、肿瘤细胞或者精子组成的组。

11.根据权利要求1所述的物质组合物，其中所述第二细胞类型是中性粒细胞或者外周血单核细胞(PBMC)。

12.根据权利要求1所述的物质组合物，其中所述第二细胞类型进行了染料标记。

13.根据权利要求1所述的物质组合物，其位于96孔板形式中。

14.根据权利要求13所述的物质组合物，其中所述第一细胞类型是HUVEC的汇合层，且其中所述第二细胞类型为中性粒细胞或PBMC。

15.根据权利要求1所述的物质组合物，其位于384孔板形式中。

16.根据权利要求13所述的物质组合物，其还含有用于图像采集的自动荧光显微镜。

17.根据权利要求16所述的物质组合物，其中所述自动荧光显微镜包括共聚焦显微镜和用于自动图像采集和同时在线分析的软件。

18.一种制备用于检测细胞迁移的物质组合物的方法，该方法包括以下步骤：

(a)在容器内沉积和固化胶原凝胶以形成含有胶原凝胶的固体层；

(b)置第一细胞类型的细胞于所述固体层上并孵育所述第一细胞类型以形成同所述固体层接触的汇合细胞层；以及

(c)将第二细胞类型的细胞接种到所述第一细胞层上。

19.一种检测细胞迁移的方法，包括以下步骤：

(a)孵育权利要求1所述的组合物；以及

(b)在所述组合物的所述固体层的第一位置检测迁移细胞。

20.一种鉴别细胞迁移的介质的方法，包括：

(a)将细胞迁移的候选介质加入到权利要求1所述的组合物中；

(b)孵育所述组合物；以及

(c)测定存在所述候选介质的情况下的细胞迁移，其中相对于缺少所述候选介质的组合物，在应答上的差异鉴别了细胞迁移的介质。

21.根据权利要求1所述的组合物，其中所述固体层还含有明胶。

22.根据权利要求18所述的方法，其中所述沉积步骤还包括将明胶溶液与所述胶原凝胶混合。

23.根据权利要求15所述的组合物，还含有用于采集图像的自动荧光显微镜。

24.根据权利要求23所述的组合物，其中所述自动荧光显微镜包括共聚焦显微镜和用于自动图像采集和同时在线分析的软件。