[发明专利]双功能锚定蛋白

权利要求书

1.一种负载抗原的免疫原性载体复合物，其包含至少一种附着于免疫 原性载体的双功能多肽，所述多肽包含融合于抗原结合域的肽聚糖结合域， 所述多肽通过该肽聚糖结合域附着于所述载体，所述抗原结合域能够非共 价结合目标抗原，

其中所述肽聚糖结合域包含LysM域的氨基酸序列，

条件是所述肽聚糖结合域能够附着于革兰氏阳性微生物的细胞壁，

以及，其中至少一种目标抗原非共价地结合于所述抗原结合域。

2.根据权利要求1所述的复合物，其中至少两种双功能多肽附着于所 述载体，各双功能多肽具有不同的抗原结合域和不同的目标抗原。

3.根据权利要求1或2所述的复合物，其中所述免疫原性载体包含 GEM颗粒。

4.根据权利要求1或2所述的复合物，其中所述微生物为非致病菌。

5.根据权利要求1或2所述的复合物，其中所述微生物为食品级细菌。

6.根据权利要求1或2所述的复合物，其中所述微生物选自乳球菌、 乳杆菌、芽孢杆菌和分支杆菌。

7.根据权利要求1或2所述的复合物，其中所述肽聚糖结合域包含乳 酸乳球菌细胞壁水解酶AcmA C末端的肽聚糖结合域。

8.根据权利要求1或2所述的复合物，其中所述抗原结合域能够结合 选自多肽、糖类、脂类和多核苷酸的抗原。

9.根据权利要求1或2所述的复合物，其中所述抗原结合域能够结合 致病抗原。

10.根据权利要求1或2所述的复合物，其中所述抗原结合域能够结 合灭活的病毒颗粒。

11.根据权利要求1或2所述的复合物，其中所述抗原结合域能够结 合纯化的抗原决定簇。

12.一种提供根据上述权利要求中任一项所述的负载抗原的免疫原性 载体复合物的方法，该方法包括如下步骤：

-提供免疫原性载体；

-提供双功能多肽，所述双功能多肽包含融合于抗原结合域的肽聚糖结 合域，以允许所述多肽附着于所述免疫原性载体；以及

-使所述免疫原性载体与所述多肽接触；

-使所述多肽与目标抗原接触。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述免疫原性载体包括GEM 颗粒。

14.根据权利要求12或13所述的方法，其中，提供所述双功能多肽 包括自随机肽或抗体文库筛选抗原结合域。

15.根据权利要求12或13所述的方法，其中，提供所述双功能多肽 包括使用噬菌体展示技术自随机肽或抗体文库筛选抗原结合域。

16.根据权利要求12或13所述的方法，其包括通过重组表达编码所 述多肽的核酸构建体而在宿主细胞中产生所述双功能多肽。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述宿主细胞在培养基中分泌 所述多肽。

18.一种药物组合物，其包含根据权利要求1-11中任一项所述的负载 抗原的免疫原性载体复合物。

19.一种免疫原性组合物，其包含根据权利要求1-11中任一项所述的 负载抗原的免疫原性载体复合物。

20.抗原结合性免疫原性载体复合物在制备用于将目标抗原递送至对 象的免疫系统的药物中的用途，所述复合物负载有所述目标抗原，所述复 合物包含：

至少一种附着于免疫原性载体的双功能多肽，所述多肽包含肽聚糖结 合域，所述多肽通过该肽聚糖结合域附着于所述载体，该肽聚糖结合 域融合于能够非共价结合所述目标抗原的抗原结合域，

其中所述肽聚糖结合域包含LysM域的氨基酸序列，

条件是所述肽聚糖结合域能够附着于革兰氏阳性微生物的细胞壁，

以及，其中至少一种目标抗原非共价地结合于所述抗原结合域。