[发明专利]BAK缺陷型以及BAK和BAX缺陷型哺乳动物细胞中mRNA干扰酶诱导的凋亡的抑制

权利要求书

1.选择性调控哺乳动物细胞的凋亡的方法，该方法包括步骤：

a.制备包含编码mRNA干扰酶多肽、mRNA干扰酶多肽的衍生物或mRNA干扰酶多肽的片段的分离的核酸序列的第一表达载体；

b.制备包含编码mRNA干扰酶拮抗剂多肽、mRNA干扰酶拮抗剂多肽的衍生物或mRNA干扰酶拮抗剂多肽的片段的分离的核酸序列的第二表达载体；

c.将第一表达载体导入哺乳动物细胞；

d.任意地将第二表达载体导入哺乳动物细胞；

e.选择性地诱导编码mRNA干扰酶多肽、mRNA干扰酶多肽的衍生物或mRNA干扰酶多肽的片段的第一表达载体表达，从而诱导细胞的凋亡，和

f.任意地选择性地诱导编码mRNA干扰酶拮抗剂多肽、mRNA干扰酶拮抗剂多肽的衍生物或mRNA干扰酶拮抗剂多肽的片段的第二表达载体表达，从而抑制细胞的凋亡。

2.权利要求1的方法，其中第一表达载体和第二表达载体各自进一步包含至少一个调控序列。

3.权利要求2的方法，其中至少一个调控序列是至少一个诱导型启动子。

4.权利要求3的方法，其中第一表达载体中的至少一个启动子有效连接至编码mRNA干扰酶多肽、mRNA干扰酶多肽的衍生物或mRNA干扰酶多肽的片段的核酸序列。

5.权利要求3的方法，其中第二表达载体中的至少一个诱导型启动子有效连接至编码mRNA干扰酶拮抗剂多肽、mRNA干扰酶拮抗剂多肽的衍生物或mRNA干扰酶拮抗剂多肽的片段的核酸序列。

6.权利要求1的方法，其中mRNA干扰酶多肽、mRNA干扰酶多肽的衍生物或mRNA干扰酶多肽的片段，当在细胞中表达时，识别细胞信使RNA中的至少一个第一mRNA干扰酶识别序列。

7.权利要求6的方法，其中至少一个第一mRNA干扰酶识别序列是腺嘌呤-胞嘧啶-腺嘌呤。

8.权利要求1的方法，其中mRNA干扰酶多肽是原核细胞多肽。

9.权利要求8的方法，其中mRNA干扰酶多肽是Ma zF。

10.权利要求1的方法，其中mRNA干扰酶拮抗剂多肽是原核细胞多肽。

11.权利要求10的方法，其中mRNA干扰酶拮抗剂多肽是MazE。

12.权利要求1的方法，其中靶哺乳动物细胞是Bak缺陷型。

13.权利要求1的方法，其中靶哺乳动物细胞是Bak和Bax缺陷型。

14.权利要求1的方法，其中靶哺乳动物细胞是肿瘤细胞。

15.权利要求1的方法，其中靶哺乳动物细胞被病原体感染。

16.权利要求15的方法，其中病原体是细菌、病毒、真菌、寄生虫或朊病毒。

17.权利要求1的方法，其中靶哺乳动物细胞是干细胞。

18.权利要求1的方法，其中靶哺乳动物细胞是已分化的细胞。

19.权利要求18的方法，其中已分化的细胞是肌细胞、肾细胞、肺细胞、甲状腺细胞、胰腺细胞、血细胞、神经细胞、神经胶质细胞或感觉细胞。

20.权利要求1的方法，其中靶哺乳动物细胞是免疫细胞。

21.权利要求1的方法，其中靶哺乳动物细胞是遗传损伤的细胞。

22.权利要求1的方法，其中靶哺乳动物细胞是毒素损伤的细胞。

23.在哺乳动物细胞中保持编码mRNA干扰酶多肽、mRNA干扰酶多肽的衍生物或mRNA干扰酶多肽的片段的分离的核酸序列的方法，该方法包括步骤：

a.制备包含编码mRNA干扰酶多肽、mRNA干扰酶多肽的衍生物或mRNA干扰酶多肽的片段的分离的核酸序列的表达载体；和

b.将该表达载体导入哺乳动物细胞，其中至少一个哺乳动物细胞的凋亡途径被阻断。

24.权利要求23的方法，该方法在步骤(b)后进一步包括诱导mRNA干扰酶多肽、mRNA干扰酶多肽的衍生物或mRNA干扰酶多肽的片段表达的步骤c。