[发明专利]标记物是Eph型标记物的细胞/配体标记系统，包含所述系统的细胞材料，其制备方法，和促血管生成的用途

权利要求书

1.细胞标记物/特异性配体型的促血管生成系统，在所述系统中，细胞标记物存在于细胞外膜上，其特征在于所述系统包含：

(a)内皮前体细胞(EPC)，其含选自由Eph组成的组的细胞标记物，所述Eph尤其是EphB4或EphB1，和

(b)以下结构的蛋白材料：

L-K(I)

其由特异针对所述标记物、并与结合蛋白(K)相连或融合的配体(L)组成，所述结合蛋白尤其是抗体Fc片段A，

所述系统能提供具有如下结构的刺激血管生成的细胞材料：

EPC-Eph-L-K(II)。

2.权利要求1所述的系统，其特征在于，所述Eph标记物是呈氨基酸序列形式的。

3.权利要求1或2所述的系统，其特征在于，所述Eph标记物是EphB。

4.权利要求1至3之任一所述的系统，其特征在于，所述标记物是EphB4或EphB1，并且所述配体是肝配蛋白-B2或肝配蛋白-B1。

5.权利要求1至4之任一所述的系统，其特征在于，所述配体(L)是肝配蛋白的肽片段。

6.权利要求1所述的系统，其特征在于，所述蛋白材料L-K被重组肝配蛋白-B2蛋白替代。

7.权利要求1至6之任一所述的系统，其特征在于，EPC得自单核细胞或表达CD34或CD133的细胞，所述单核细胞或表达CD34或CD133的细胞源于骨髓、外周血或优选源于脐带血。

8.权利要求1至7之任一所述的系统，其特征在于，EPC得自外周血或脐带血。

9.能刺激血管生成的细胞材料，其特征在于，它具有如下结构：

EPC-Eph-L-K(II)

其中所述配体L与结合蛋白K相连或融合，所述细胞材料能够：(i)是基本上纯的细胞培养物的形式的，或是与其他前体细胞、尤其是单核细胞组合的细胞培养物的形式的，而且(ii)在适当时，是冰冻的。

10.权利要求8所述的细胞材料，其特征在于，它在施用于施用位点之前通过温育下列成分而获得：

(a)含细胞标记物的内皮前体细胞(EPC)，所述标记物选自由Eph组成的组，特别是EphB4或EphB1，和

(b)如下结构的蛋白材料：

L-K(I)

其由特异针对所述标记物、并与结合蛋白(K)相连或融合的配体(L)组成，所述结合蛋白(K)尤其是抗体Fc片段。

11.权利要求9或10所述的细胞材料，其特征在于，所述标记物是EphB4或EphB1，而且所述配体是肝配蛋白-B2或肝配蛋白-B1。

12.权利要求9至11之任一所述的细胞材料，其特征在于，所述配体是肝配蛋白的肽片段。

13.制备权利要求7和8之任一所述的细胞材料的方法，所述方法的特征在于它包括如下步骤：

利用在外膜上表达Eph家族标记物的EPC，所述Eph尤其是EphB4或EphB1，而且

将所述EPC在体外与蛋白质材料L-K接触，其中L是特异于所述标记物的配体，K是与L相连或融合的结合蛋白。

14.权利要求13所述的方法，其特征在于，它包括以下步骤：

(1°)利用源自骨髓、外周血或脐带血的单核细胞，

(2°)使前述步骤中的所述细胞分化，由此获得带有Eph标记物的EPC，和

(3°)通过使肝配蛋白与Eph结合，体外活化步骤(2°)中获得的EPC。

15.权利要求14所述的方法，其特征在于，它在步骤(1°)和(2°)之间包括如下的额外步骤：

(1a°)分离CD34⁺和/或CD133⁺单核细胞。

16.权利要求14所述的方法，其特征在于，在步骤(1°)中，单核细胞源自外周血或脐带血。

17.权利要求13至16之任一所述的方法，其特征在于，所述配体L与结合蛋白K相连或融合，从而提供如下结构的细胞材料：

EPC-Eph-L-K  (II)

其中K是Fc。