[发明专利]使用亲脂离子作为介质添加剂，电处理细胞以改变这些细胞的膜通透性的方法

权利要求书

1. 用电场处理细胞以改变这些细胞的膜通透性的方法，所述方法包括下述步骤：

-提供在处理介质(2)中的至少一个细胞(1)，和

-向所述细胞(1)施加至少一个电压脉冲，

其特征为下述步骤：

-向所述处理介质(2)中加入亲脂离子。

2. 根据权利要求1的方法，其为或者包括所述细胞的电处理，特别是电穿孔或电融合。

3. 根据权利要求1或2的方法，其中所述细胞为原核细胞或真核细胞。

4. 根据权利要求3的方法，其中所述细胞为活细胞。

5. 根据权利要求1或2的方法，其中所述细胞是天然的或合成的膜包裹的小泡、脂质体或微团。

6. 根据权利要求1至5中至少一项的方法，其中将所述亲脂离子以1nM至100μM的浓度加至所述处理介质(2)中。

7. 根据权利要求1至6中至少一项的方法，其中向所述处理介质(2)中加入所述亲脂离子导致这些亲脂离子掺杂要处理的细胞的膜。

8. 根据权利要求1至7中至少一项的方法，其中所述亲脂离子为阳离子、阴离子或阳离子和阴离子的混合物。

9. 根据权利要求1至8中至少一项的方法，其中所述亲脂离子为阴离子。

10. 根据权利要求9的方法，其中该亲脂阴离子包括至少一种物质，所述物质选自包括亲脂性金属复合物的阴离子、亲脂性有机金属化合物的阴离子和含有至少一个可去质子化的官能团的亲脂性有机化合物的阴离子的阴离子组。

11. 根据权利要求10的方法，其中所述亲脂阴离子包括至少一种物质，所述物质选自包括亲脂性钨复合物(LTCs)的阴离子，特别是亲脂性钨羰基复合物的阴离子，二苦胺(DPA)及其衍生物的阴离子，包含至少一个羧酸、磺酸、硫酸、硫代硫酸或硫氰酸基团的亲脂性有机化合物的衍生物的阴离子，特别是花生四烯酸的阴离子，或者取代或未取代的四苯基硼酸或苯基二碳十一烷癸硼烷(PCB)的阴离子或四氰基硼酸的阴离子[B(CN)₄]^-或四三氟甲基硼酸的阴离子[B(CF₃)₄]^-的阴离子组。

12. 根据权利要求11的方法，其中所述亲脂阴离子选自下述阴离子：

13. 根据前述权利要求中至少一项的方法，其中所述亲脂离子与活细胞是生理学相容的。

14. 根据前述权利要求中至少一项的方法，其中所述亲脂离子可被紫外光降解并生成与活细胞生理学相容的降解产物。

15. 根据权利要求1至14中至少一项的方法，其中所述亲脂离子增加作为所述细胞的膜电压的函数的所述细胞的膜电容C。

16. 根据权利要求15的方法，其中所述膜电压的依赖性具有对称或不对称钟形曲线的行为，其具有最大电压V_max，在该最大电压V_max处电容C(V_max)的增加为最大值。

17. 根据前述权利要求中至少一项的方法，其中在预实验期间选择所述亲脂离子，其包括下述步骤：

-测量作为施加的膜电压的函数的生物细胞的膜电容，其中用在所述处理介质(2)中的多种不同的亲脂离子测量由亲脂离子诱导的所述膜电容的电压依赖性，和

-识别并选择由亲脂离子诱导的所述细胞(1)的膜电容符合预定的选择标准的亲脂离子。

18. 根据权利要求17的方法，其中选择在所述细胞(1)的自然膜电压下，所述膜电容为最小值的那些亲脂离子或者落在权利要求16中所述的钟形曲线的下降侧之一中的那些亲脂离子。

19. 根据权利要求17的方法，其中选择在所述细胞(1)的自然膜电压下，所述膜电容为最大值的那些亲脂离子。

20. 根据权利要求17至19中至少一项的方法，其包括下述步骤：

-向所述处理介质(2)中加入盐以调节所述细胞(1)的自然膜电压。