[发明专利]一种高纯度的人第Ⅸ凝血因子的制备方法有效
| 申请号： | 200680039024.1 | 申请日： | 2006-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN101291951A | 公开（公告）日： | 2008-10-22 |
| 发明（设计）人： | 姜镛;崔龙云;孙基桓;李成来;成学模;金基镕;许在旭 | 申请（专利权）人： | 株式会社绿十字 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14 |
| 代理公司： | 中科专利商标代理有限责任公司 | 代理人： | 王旭 |
| 地址： | 韩国*** | 国省代码： | 韩国;KR |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 纯度 凝血 因子 制备 方法 | ||
1. 一种人第IX凝血因子的制备方法，以包含第IX凝血因子的物 质为原料来制备人第IX凝血因子，且包括如下步骤：
通过进行1次以上阴离子交换层析收集人第IX凝血因子的阶段；
通过进行肝素亲合层析进行洗提的阶段；
通过进行阳离子交换层析收集非吸附液的阶段；
通过进行纳米过滤去除病毒的阶段。
2. 根据权利要求1所述的人第IX凝血因子的制备方法，其中在 所述通过进行肝素亲合层析进行洗提的阶段，在适用包含第IX因子的 溶液之前所使用的平衡缓冲液的离子强度(ionic strength)和包含第IX 因子的溶液的离子强度为20mS/cm以下、pH为5.0～9.0，在洗涤吸 附于缓冲液的其他蛋白质时的洗涤缓冲液的离子强度为10～ 20mS/cm，在洗提包含第IX因子的溶液时的洗提缓冲液的离子强度为 20～50mS/cm。
3. 根据权利要求1所述的人第IX凝血因子的制备方法，其中所 述阳离子交换层析的柱官能团选自羧甲基(carboxymethyl-，CM-)、羧 基(carboxy-，C-)、磺基(sulfo-，S-)、磺酸甲基(sulfomethyl，SM-)、磺乙 基(sulfoethyl-，SE-)、磺丙基(sulfopropyl-，SP-)、二氧磷基(phospho-， P-)，柱树脂(resine)选自琼脂糖凝胶(Sepharose)、葡聚糖(Sephadex)、 琼脂糖(agarose)、葡聚糖纤维素(Sephacel)、聚苯乙烯(Polystyrene)、 聚乙烯(Polyacrylate)、纤维素(Cellulose)、Toyopearl。
4. 根据权利要求1所述的人第IX凝血因子的制备方法，其中所 述通过进行阳离子交换层析收集非吸附液的阶段，是在pH3.0～6.0 的条件下进行的。
5. 根据权利要求1所述的人第IX凝血因子的制备方法，其中在 所述通过进行阳离子交换层析收集非吸附液的阶段，包含平衡缓冲液 和第IX因子的溶液的离子强度为10～50mS/cm。
6. 根据权利要求1所述的人第IX凝血因子的制备方法，包含第 IX凝血因子的物质为人血浆或重组的第IX凝血因子的细胞培养基。
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