[发明专利]RNA的提取方法及RNA的检测方法无效
申请号: | 200680040074.1 | 申请日: | 2006-11-02 |
公开(公告)号: | CN101297037A | 公开(公告)日: | 2008-10-29 |
发明(设计)人: | 外池宏司;白崎良成;西村直行;玉造滋;渡边久穗美;坂仓康彦;中山博之 | 申请(专利权)人: | 株式会社岛津制作所 |
主分类号: | C12N15/00 | 分类号: | C12N15/00;C12N15/09;C12Q1/68 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 | 代理人: | 李贵亮 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | rna 提取 方法 检测 | ||
1.一种RNA的提取方法,其中,
包括:
在加热条件下得到含有RNA包含体及RNA分解酶的样本与至少含有还原剂的碱性处理试剂的pH为8.1以上的混合物的工序;
通过在所述加热条件下维持所述混合物来进行所述RNA分解酶的失活和从RNA包含体提取RNA的工序。
2.根据权利要求1所述的RNA提取方法,其中,
所述处理试剂含有从Tris缓冲液、Good缓冲液、硼酸盐缓冲液以及碳酸盐缓冲液构成的组中选择的碱性缓冲液。
3.根据权利要求1所述的RNA提取方法,其中,
所述处理试剂含有从氢氧化物、氨以及胺构成的组中选择的碱性物质。
4.根据权利要求1所述的RNA提取方法,其中,
所述还原剂为硫醇型还原剂。
5.根据权利要求1所述的RNA提取方法,其中,
所述样本从生物样本、生物来源样本、环境样本以及环境来源样本构成的组中选择。
6.根据权利要求1所述的RNA提取方法,其中,
所述样本从排泄物样本及排泄物来源样本构成的组中选择。
7.根据权利要求1所述的RNA提取方法,其中,
所述RNA包含体从细胞、真菌、细菌以及RNA病毒构成的组中选择。
8.根据权利要求7所述的RNA提取方法,其中,
所述RNA病毒从逆转录酶病毒(retrovirus)、诺罗病毒(norovirus)、轮状病毒(rotavirus)以及丙型肝炎病毒构成的组中选择。
9.根据权利要求8所述的RNA提取方法,其中,
在所述RNA病毒为逆转录酶病毒的情况下,所述逆转录酶病毒为艾滋病毒。
10.根据权利要求1所述的RNA提取方法,其中,
所述RNA为mRNA。
11.一种RNA提取方法,其中,
包括:
在至少含有还原剂的溶液中混杂含有RNA包含体及RNA分解酶的样本的工序;
将所述样本与所述还原剂的混合液调节至25℃下pH为8.1以上的工序;
通过将已调节pH的所述混合液提供到加热条件下,来进行所述RNA分解酶的失活和从所述RNA包含体提取RNA的工序。
12.一种RNA检测方法,其中,
包括:
在加热条件下得到含有RNA包含体及RNA分解酶的样本与至少含有还原剂的碱性处理试剂的pH为8.1以上的混合物的工序;
通过在所述加热条件下维持所述混合物来进行所述RNA分解酶的失活和从RNA包含体提取RNA,从而获得含有提取的RNA的样本处理液的工序;
混合所述样本处理液和扩增用反应液来进行RNA扩增反应。
13.根据权利要求12所述的RNA检测方法,其中,
所述处理试剂含有从Tris缓冲液、Good缓冲液、硼酸盐缓冲液以及碳酸盐缓冲液构成的组中选择的碱性缓冲液。
14.根据权利要求12所述的RNA检测方法,其中,
所述处理试剂含有从氢氧化物、氨以及胺构成的组中选择的碱性物质。
15.根据权利要求12所述的RNA检测方法,其中,
所述还原剂为硫醇型还原剂。
16.根据权利要求12所述的RNA检测方法,其中,
所述样本从生物样本、生物来源样本、环境样本以及环境来源样本构成的组中选择。
17.根据权利要求12所述的RNA检测方法,其中,
所述样本从排泄物样本及排泄物来源样本构成的组中选择。
18.根据权利要求12所述的RNA检测方法,其中,
所述RNA包含体从细胞、真菌、细菌以及RNA病毒构成的组中选择。
19.根据权利要求18所述的RNA检测方法,其中,
所述RNA病毒从逆转录酶病毒、诺罗病毒、轮状病毒以及丙型肝炎病毒构成的组中选择。
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