[发明专利]包括破坏血球成分的步骤的样品中亲和物质的测定方法无效
申请号: | 200680044243.9 | 申请日: | 2006-09-29 |
公开(公告)号: | CN101317094A | 公开(公告)日: | 2008-12-03 |
发明(设计)人: | 岩田惠助 | 申请(专利权)人: | 脉冲-免疫技术株式会社 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N33/49 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 刘冬;孙秀武 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 包括 破坏 血球 成分 步骤 样品 亲和 物质 测定 方法 | ||
1.一种包括以下步骤的亲和物质的测定方法,其中测定对象亲和物质包含在含血球成分的介质中,该测定方法在步骤(1)或(1’)中、或步骤(1)或(1’)之前、或者步骤(1)或(1’)中和步骤(1)或(1’)之前包括电破坏血球成分的步骤,
(1)对将结合有与测定对象亲和物质具有结合活性的结合配偶体的载体颗粒和测定对象亲和物质混合得到的反应液施加电压脉冲的步骤;
(2)在进行步骤(1)后,对通过与作为测定对象的亲和物质结合所形成的载体颗粒的凝集块、以及不与作为测定对象的亲和物质结合而未形成凝集块的载体颗粒的任一方或两方,以其三维信息为指标进行计数的步骤;和
(3)在进行步骤(2)后,基于凝集块的形成水平、以及未形成凝集块的载体颗粒的水平的任一方或两方,确定测定对象物质的水平的步骤,或者
(1’)对将结合有与测定对象亲和物质具有结合活性的结合配偶体的载体颗粒、测定对象亲和物质与凝集试剂成分混合得到的反应液施加电压脉冲的步骤,其中上述载体颗粒通过凝集试剂凝集,并且利用测定对象亲和物质阻碍其凝集;
(2’)在进行步骤(1’)后,对通过与凝集试剂结合所形成的载体颗粒的凝集块、以及利用与作为测定对象的亲和物质结合而阻碍凝集的载体颗粒的任一方或两方,以其三维信息为指标进行计数的步骤;和
(3’)在进行步骤(2’)后,基于凝集块的形成水平、以及未形成凝集块的载体颗粒的水平的任一方或两方,确定测定对象物质的水平的步骤。
2.权利要求1所述的方法,其中血球成分通过10~70V/mm的交流电压脉冲破坏。
3.权利要求2所述的方法,其中血球成分通过40~70V/mm的交流电压脉冲破坏。
4.权利要求3所述的方法,其中血球成分通过50~60V/mm的交流电压脉冲破坏。
5.权利要求1所述的方法,其中在步骤(2)或(2’)中,物理性测定凝集块或载体颗粒的三维信息。
6.权利要求5所述的方法,其中用于物理性测定三维信息的方法为选自电阻法、激光衍射散射法和三维图像解析法中的任一种方法。
7.权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤(2)或(2’)中,将电场停止后,对载体颗粒进行计数。
8.权利要求7所述的方法,其中在步骤(2)或(2’)中,将电场停止后,进一步包括对载体颗粒进行稀释的步骤。
9.权利要求1所述的方法,其特征在于,施加多次电压脉冲。
10.权利要求9所述的方法,其中施加电压脉冲后,包括使载体颗粒分散,再施加随后的电压脉冲的步骤。
11.权利要求9所述的方法,其中多次电压脉冲为不同方向的电压脉冲。
12.权利要求1所述的方法,其中载体颗粒的平均粒径为1μm以上。
13.权利要求12所述的方法,其中载体颗粒的平均粒径为1μm~20μm。
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