[发明专利]使用受保护胺盐制备含末端胺基团的聚合物的方法

说明书

发明领域

本发明涉及活性聚合物例如聚氧化烯的制备方法。具体来说，本发明涉及制备高纯度含末端胺的线性聚合物的方法。

发明背景

水溶性聚氧化烯与治疗性部分如蛋白质和多肽的结合作用(conjugation)是已知的。参见，例如，美国专利4,179,337号，该文献的公开内容在此引入供参考。该′337专利公开了用PEG改性的生理学活性多肽在体内循环延长的时间，并且具有降低的致免疫力和抗原性。

为了结合聚氧化烯结合，该聚合物的羟基末端基必须首先被转化成活性官能团。这种方法通常称为″活化″且该产物称作″活化聚氧化烯″。类似地活化其它的聚合物。

胺末端聚合物如PEG-NH₂是已知的。参见Zalipsky等人的Eur.Polym.J.Vol.19 No.12.，pp1177-1183。它们可以″原态″用于与一些生物活性化合物上存在的COOH基团直接结合。更通常，当希望其它聚合物输送体系时，PEG-NH₂(或PEG-胺)用作进一步官能化的中间体。例如，含有苄基消除体系、三甲基封闭体系等的某些聚合物基药物输送平台体系(platform system)可以包括PEG-NH₂作为合成过程中的关键中间体。参见Greenwald等人J.Med.Chem.Vol.42，No.18，3657-3667；Greenwald等人J.Med.Chem.Vol.47，No.3，726-734；Greenwald等人的J.Med.Chem.Vol.43，No.3，475-487。上述文献每一篇的内容在此引入作为参考。

PEG-胺还可用于与生物活性小分子和具有可利用醛基的多肽结合(经由还原胺化)。也参见Nektar Advanced PEGylation catalog 2005-2006，24页，该文献的内容在此引入作为参考。

过去，一般已知PEG-胺可以如下制备：由PEG-OH制备PEG-卤化物、甲磺酸酯或甲苯磺酸酯，此后与氨水(Hoffmann反应)、叠氮化钠或苯邻二甲酰亚胺钾(Gabriel试剂)进行亲核取代反应。PEG卤化物与氨的反应直接地形成PEG-胺。更重要地，一个主要缺点在于较大百分率的PEG-卤化物在该浓氨水处理期间水解而形成PEG-OH。当形成较高分子量的PEG-胺时，这是尤其关注的。PEG分子量越高，形成PEG-OH越多。例如，在PEG_5,000的情况下，该量大约为5％且在更高分子量PEG如PEG_40,000的情况下，该量可能高达20％。因此，所需最终产物的纯度可能显著地降低。

即使当使用PEG-叠氮化物作为中间体来制备PEG-胺时，当使用金属催化氢化时，也已观察到某些缺点。另外，与苯邻二甲酰亚胺钾的反应提供以碱保护的胺，在回流下用在乙醇中的肼将该以碱保护的胺去保护。这也具有缺陷。除去邻苯二甲酰基团需要的苛刻条件和需要对最终产物的强烈纯化显著地增加了所需产物的成本。

鉴于上文所述，最好是提供改进的方法用于制备克服现有技术中的缺点和缺陷的PEG-胺和相关的含末端胺的聚合物。本发明满足了这种需要。

发明概述

在本发明的一个优选的方面中，提供了制备含末端胺的聚合物的改进方法。该方法包括使通式(I)的基本上非抗原性的聚合物

(I)R₃-R₂-R₁

其中

R₁是活性聚合物末端基如离去基团；

R₂是基本上非抗原性的聚合物；和

R₃是封端基团或R₁；

与受保护胺盐反应以形成含末端受保护胺的聚合物；和此后使该由此得到的含末端受保护胺的聚合物与酸反应以除去该保护基和形成含末端胺的聚合物。

优选的活性聚合物末端基的实例包括离去基团如甲苯磺酸酯基(tosylate)、甲磺酸酯基(mesylate)、对溴苯磺酸酯基(brosylate)、三氟乙基磺酸酯基(tresylate)、间硝基苯磺酸酯基(nosylate)、Br、Cl等。