[发明专利]使用转化的酵母产生神经酰胺方法

说明书

技术领域

本申请主张基于2005年12月5日提交的日本专利申请2005-351366的优先权。

本发明涉及在酵母细胞内产生人神经酰胺的方法。

背景技术

皮肤的最外层，存在着具有保持水分的保湿功能和保护肌肤不受外界刺激的屏障功能的称为角质层的组织。角质层由角质细胞和天然保湿因子、及细胞间脂质构成，其中特别是约占细胞间脂质一半的神经酰胺对上述功能起着极为重要的作用。例如，异位性皮炎(atopic dermatitis)、老年性干皮病(senile xerosis)共同的特征是保湿功能显著降低，已知其主要原因是由于脂代谢酶异常而引起的神经酰胺量的减少。也已证实神经酰胺具有增强屏障功能、提供美白作用以及抑制黑素生成的作用。神经酰胺是可从外界补充的物质。

J Invest Dermatol.96：523-526，1991(非专利文献1)、Arch Dermatol Res.283：219-223，1991(非专利文献2)中公开了《异位性皮炎、老年性干皮病中神经酰胺量的减少(decreased ceramide levels in atopic dermatitis and senile xerosis)》，J Dermatol Sci.1：79-83，1990(非专利文献3)、Acta Derm Venereol.74：337-340，1994(非专利文献4)中公开了《神经酰胺量的减少与脂代谢酶异常(decreasedceramide levels and lipid metabolic enzyme abnormalities)》，Contact Dermatitis.45：280-285，2001(非专利文献5)、J Eur Acad Dermatol Venereol.16：587-594，2002(非专利文献6)中公开了《神经酰胺的屏障功能的恢复(restoration of barrierfunction by ceramides)》，且Cell Signal 14：779-785，2002(非专利文献7)中公开了《通过神经酰胺抑制黑素生成(inhibition of melanogenesis by ceramides)》。

近年来，其作为针对干燥敏感肌肤带来的皮肤疾病的治疗药物或化妆品/美容健康食品的材料受到极大关注。实际上，作为化妆品、食品或营养补助食品等，配合了神经酰胺的大量产品已有市售，且神经酰胺原料市场的规模有持续扩大的趋势。

作为神经酰胺的原料，至今为止所使用的是来自牛等动物的原料，但因被指出有传染病的问题，所以目前以米、小麦、大豆、薯类等的植物性神经酰胺为主流。最近的基础研究[J.Clin.Invest.112：1372-1382，2003(非专利文献8)]已证实，神经酰胺的结构在皮肤保湿和屏障功能上极为重要，而与人的神经酰胺结构不同的植物性神经酰胺是否是功能性强的脂质还留有疑问。且因动植物中存在的神经酰胺为微量且提取和纯化较为困难，生产率低、成本高，所以，强烈希望开发出可克服这些缺点的新的生产技术。

如图1所示，已知神经鞘脂类合成和代谢途径中，二氢神经鞘氨醇(DHS)生物合成和随后的反应在包括人的高等动物细胞和酵母之间有很大差异。此外，在神经鞘脂类合成和代谢途径中，对于各个过程中起作用的各个酶蛋白质及编码该蛋白质的基因，也已获得了一定程度的认识[Biochemistry.41：15105-15114.2002(非专利文献9)；J Biol Chem.277：25512-25518，2002(非专利文献10)；Yeast 9：267-277，1993(非专利文献11)；J Biol Chem272：29704-29710，1997(非专利文献12)；J Biol Chem 275：31369-31378，2000(非专利文献13)；J Biol Chem 275：39793-39798，2000(非专利文献14)]。

非专利文献1：J Invest Dermatol.96：523-526，1991

非专利文献2：Arch Dermatol Res.283：219-223，1991

非专利文献3：J Dermatol Sci.1：79-83，1990

非专利文献4：Acta Derm Venereol.74：337-340，1994

非专利文献5：Contact Dermatitis.45：280-285，2001