[发明专利]凝集测量用试剂以及凝集测量方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于通过用特异受体致敏的不溶性载体颗粒的 凝集反应测量配体的凝集测量用试剂，以及凝集测量方法。

背景技术

检测凝集反应的测量方法已传统地并广泛地使用(应用)于 方法如平板凝集试验中。特别地，已主要使用利用抗原-抗体 反应的免疫凝集方法，这是由于其在灵敏度、特异性和再现性 方面优良。

最近，使用用特异性识别作为抗原的靶配体的抗体致敏的 不溶性载体颗粒和广泛使用的自动分析仪已能够高灵敏度地简 便测量该配体。因此，免疫凝集方法已广泛地用于临床检测等。 免疫凝集方法是通过使不溶性载体颗粒基于该抗原-抗体反应 凝集并光学测量所获得的凝集度来进行靶配体浓度测量的方 法。作为该不溶性载体颗粒，通常使用乳胶。在这种情况下， 该方法特别称为乳胶比浊法免疫检测(latex turbidimetric immunoassay)(下文缩写为LTIA法)。

众所周知，在LTIA法中，添加凝结促进剂如氯化钠或胍加 速免疫凝集的形成和提高测量灵敏度(专利文献1)。

然而，这些凝集促进剂与抗体致敏的乳胶共存导致与免疫 反应无关的抗体致敏的乳胶的非特异凝集(也称自发凝集)。存 在以共存状态长期贮存后，上述颗粒最终沉淀的问题。所以， 作为用于LTIA法的测量试剂，通常使用双液试剂形式(two-shot reagent format)。将该抗体致敏的乳胶和该凝集促进剂作为组成 试剂单独制备，在进行测量时一起混合。

在专利文献2中，公开了将氨基磺酸盐溶解于试剂以分散乳 胶试剂的方法，这是因为氨基磺酸盐抑制来自在乳胶凝集反应 中的测量试样组分的非特异性聚集和具有优良的贮存稳定性。

另外，专利文献3公开了稳定化方法，其中使氨基酸酯或聚 胺在乳胶试剂中共存以使蛋白质能够稳定化，因而各自结合到 乳胶的蛋白质彼此之间的非特异性聚集受到抑制。

然而，这些文献仅描述了乳胶的非特定性聚集受到抑制的 试剂的稳定化，并没有描述促进凝集反应的效果。

此外，即使在将氯化钠或胍用作反应促进剂的情况下，当 如在使用自动分析仪测量的情况中限定测量时间时，不一定获 得满意的测量灵敏度。所以，期望提供具有更高效果的反应促 进剂。

专利文献1：JP 11-344493 A

专利文献2：JP 07-229900 A

专利文献3：JP 2004-108850 A

发明内容

本发明解决的问题

提供本发明以解决上述传统技术问题。本发明的目的是提 供使用有机胺化合物的凝集测量用试剂以及其测量方法，所述 凝集测量用试剂不会引起受体致敏乳胶的自发凝集，即使是该 受体致敏乳胶与该有机胺化合物共存。

而且，本发明另一目的是提供反应促进效果优于传统反应 促进剂如氯化钠或胍的使用有机胺化合物的凝集测量用试剂和 其测量方法。

解决问题的手段

本发明的发明人透彻地研究了在用于乳胶凝集的测量方法 中不引起受体致敏乳胶的自发凝集的化合物。结果，本发明人 发现一定种类的有机胺化合物具有促进凝集反应而不引起受体 致敏乳胶的自发凝集的效果，由此完成本发明。

此外，本发明人发现这些有机胺化合物的某一些具有优于 传统反应促进剂的反应促进效果，从而完成本发明。

即，本发明具有以下构成。

(1)凝集测量用试剂，其包括使用与靶配体特异性反应的受 体致敏的不溶性载体颗粒和有机胺化合物。

(2)根据项目(1)所述的凝集测量用试剂，其中该有机胺化合 物是选自如下化合物的一种或多种：2-氨基-2-噻唑啉盐酸盐、 苄脒盐酸盐、苄胺盐酸盐、胍盐酸盐、氨基比林、安替比林、 4-氨基安替比林、邻苯二胺二盐酸盐、对甲氧基苯胺盐酸盐、 盐酸苯海拉明、2，4-二氨基苯甲醚二盐酸盐、盐酸吡啶、1，4- 苯二胺盐酸盐、氨基胍盐酸盐和盐酸甜菜碱。

(3)根据项目(1)或(2)所述的凝集测量用试剂，其中该不溶 性载体颗粒包含乳胶。

(4)根据项目(1)至(3)中任一项所述的凝集测量用试剂，其 中该受体包含抗体如多克隆抗体、单克隆抗体或包括其反应性 位点的片段，并测量来自免疫反应的凝集。