[发明专利]抗乙型肝炎病毒核酶核酸

权利要求书

1.可转录为RNA的核酶DNA，其将在CUC位点切割HBV RNA。

2.根据权利要求1的核酶DNA，可转录为具有催化(切割)序列的RNA，所述催化(切割)序列的两部分中间夹有具有GCGCGAAAGCGC序列的居间稳定茎。

3.根据权利要求1或2的核酶DNA，具有如SEQ ID NO：4(MAZ1)所示的核苷酸序列。

4.根据权利要求1或2的核酶DNA，具有如SEQ ID NO：5(SGIII)所示的核苷酸序列。

5.根据权利要求1或2的核酶DNA，具有如SEQ ID NO：6(DGII)所示的核苷酸序列。

6.根据权利要求1或2的核酶DNA，其可转录为结合HBV识别位点的RNA，所述HBV识别位点具有核苷酸序列GGCUCUCUCGUCCC(MAZ1)。

7.根据权利要求1或2的核酶DNA，其可转录为结合HBV识别位点的RNA，所述HBV识别位点具有核苷酸序列CCUCAGCUCUGUAUCG(SGIII)。

8.根据权利要求1或2的核酶DNA，其可转录为结合HBV识别序列的RNA，所述HBV识别序列具有核苷酸序列GAGGACUCUUGGA(DGII)。

9.根据前述任一项权利要求的核酶DNA，其转录为锤头结构核酶。

10.核酶DNA，当其转录为RNA时，将对存在于HBV RNA中的靶RNA序列上的三个位点切割，所述位点包含如下的识别序列(5＇到3＇)

GGCTCTCTCGTCCC　　对于核酶MAZI

CCTCAGCTCTGTATCG　对于核酶SGIII

GAGGACTCTTGGA　对于核酶DGII。

11.载体系统，包含至少一个DNA载体，该载体包含在对人类细胞有效的启动子控制下的靶向切割的核酶DNA序列，所述靶向切割的核酶DNA序列一旦转录为RNA将在CUC位点处切割从HBV靶基因组转录的RNA。

12.根据权利要求11的载体系统，包含可切割从HBV靶基因组转录的mRNA的MAZI、DGII和SGIII核酶中的一个或多个的靶向切割核酶序列。

13.根据权利要求11或12的载体系统，包含至少两个DNA载体，其中第一个载体包含对人类细胞有效的第一启动子，第一启动子有效连接于可表达产生能作用于第二启动子的激活蛋白的基因，和第二个载体包含第二启动子，所述第二启动子有效连接于MAZI RNA、DGII RNA和SGIII RNA靶向切割核酶DNA序列和靶HBV RNA的靶向切割核酶DNA序列的一个或多个。

14.根据权利要求13的载体系统，包含至少三个DNA载体，其中第二个载体包含MAZI靶向切割核酶DNA和其中第三个载体包含切割转录自HBV靶RNA的mRNA的SGIII靶向切割核酶DNA。

15.根据权利要求14的载体系统，包含至少四个DNA载体，其中第二个载体包含MAZI靶向切割核酶DNA，第三个载体包含SGIII靶向切割核酶DNA和第四个载体包含用于切割由HBV靶RNA转录的mRNA的DGII靶向切割核酶DNA。

16.根据权利要求15的载体系统，包含至少五个DNA载体，其中第二个载体包含MAZI靶向切割核酶DNA和其中第三个载体包含SGIII靶向切割核酶DNA，第四个载体包含DGII靶向切割核酶DNA和第五个载体包含由HBV靶RNA转录的另一核酶切割mRNA的靶向切割核酶DNA。

17.根据权利要求13到16任一项的载体系统，其中第二启动子是T7聚合酶启动子，和激活蛋白是T7聚合酶。

18.根据权利要求17的载体系统，其中T7启动子中的一个或两个进一步包含提供内部核糖体进入位点(IRES)的DNA，用于帮助翻译人类细胞中T7聚合酶基因。

19.根据权利要求11到18任一项的载体系统，其中核酶序列是锤头型核酶。