[发明专利]活化的分裂多肽及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种用于检测个体中的疾病或障碍的方法，所述方法包括：

a.从个体中获得待测生物学样品；

b.从所述生物学样品中分离DNA或者RNA；

c.将所述DNA或RNA与分裂荧光多肽分子接触，其中将所述分裂荧光 多肽片段结合到核酸结合基序上，并且其中至少一个所述的核酸结合基序是 特异于与疾病或障碍相关的特定核酸的；和

d.检测所述可检测蛋白的信号改变，其中所述信号改变表明存在一种疾 病或障碍。

2.一种用于检测个体中的疾病或障碍的方法，所述方法包括：

a.从个体中获得待测生物学样品；

b.从所述生物学样品中分离出非核酸的分析物；

c.将所述非核酸的分析物与分裂荧光多肽分子接触，其中所述分裂荧光多 肽片段结合到所述非核酸分析物的结合基序上，并且其中至少一个分析物结 合基序特异于与疾病或障碍相关的特定核酸；和

d.检测可检测蛋白的信号变化，其中信号改变指示存在一种疾病或障碍。

3.权利要求1和2的方法，其中所述分裂荧光多肽包括：

a.EGFR肽的第一片段，包括从氨基酸1至约氨基酸158；和

b.EGFR肽的第二片段，包括大约氨基酸159至氨基酸239；和

c.位于第一和第二EGFR片段之间的切割肽。

4.权利要求1和2的方法，其中该疾病是病原体。

5.权利要求1和2的方法，其中所述病原体选自：病毒、流感病毒、细菌、 真菌、寄生虫或酵母。

6.权利要求4的方法，其中该病原体是病毒。

7.权利要求1和2的方法，其中该疾病是疾病遗传倾向的。

8.一种包含分裂荧光多肽的内含体的制剂，其中所述分裂荧光多肽包括：

a.EGFR肽第一片段，包括从氨基酸1到约氨基酸158；和

b.EGFR肽第二片段，包括大约氨基酸159到氨基酸239；和

c.位于第一和第二EGFR片段之间的切割肽。

9.一种分裂多肽蛋白片段分子，所述分裂多肽蛋白片段分子包含可检测蛋 白的至少两个多肽片段，其中该片段：(a)处于活化形式；(b)本身无活性；(c) 还包含核酸结合基序；以及(d)在靶核酸的存在下迅速互补来实时地重新构建 所述的活性蛋白。

10.权利要求7的分裂多肽蛋白片段分子，其中所述靶核酸选自：DNA、 RNA、PNA及其类似物。

11.一种分裂多肽蛋白片段分子，所述分裂多肽蛋白片段分子包含可检测 蛋白的至少两条多肽片段，其中所述片段：(a)处于活化形式；(b)本身无活性； (c)还包含非核酸分析物的结合基序；以及(d)在靶分析物分子的存在下迅速互 补来实时地重新构建所述活性蛋白。

12.权利要求9的分裂多肽蛋白片段分子，其中所述靶分析物分子是生物 分子、有机分子或无机分子。

13.权利要求9和11的分裂多肽蛋白片段分子，其中所述的可检测蛋白 是荧光蛋白。

14.权利要求9和11的分裂多肽蛋白片段分子，其中所述荧光蛋白选自： 绿色荧光蛋白(GFP)、GFP样荧光蛋白(GFP样)、增强的绿色荧光蛋白 (EGFP)、黄色荧光蛋白(YFP)、增强的黄色荧光蛋白(EYFP)、蓝色荧光蛋白 (BFP)、增强的蓝色荧光蛋白(EBFP)、蓝绿色荧光蛋白(CFP)、增强的蓝绿色 荧光蛋白(ECFP)，和红色荧光蛋白(dsRED)以及它们的变体。