[发明专利]用于鉴定细胞信号转导调节物的方法

权利要求书

1. 一种用于鉴定细胞信号转导途径的抑制剂或者促进剂的潜在调节物的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)提供不是得自人胚胎或胎儿的胚胎干细胞，其中所述胚胎干细胞能够经由与体内的祖细胞群细胞基本相同的祖细胞分化为第二种细胞类型；通过使所述胚胎干细胞序贯暴露于两种或更多种培养条件从而由胚胎干细胞获得所述祖细胞，其中所述培养条件是指掺入培养基中并影响生长和/或分化的特定物质；

(b)使获得的祖细胞暴露于所述潜在调节物；和

(c)监测分化情况，以确定第二种细胞类型的形成。

2.权利要求1的方法，其中所述胚胎干细胞被修饰以使其进行扩增。

3.权利要求1的方法，其中所述胚胎干细胞为自我更新干细胞。

4.权利要求1的方法，其中所述步骤(a)是针对作为细胞单元组成部分的细胞进行的。

5.权利要求4的方法，其中所述细胞单元包括微载体或其它支持物。

6.权利要求1的方法，其中所述培养条件包括筛选细胞信号转导途径的抑制剂或者促进剂的潜在调节物。

7.权利要求1的方法，其中所述祖细胞为沿着干细胞和分化细胞类型之间的分化途径停滞的细胞。

8.权利要求1的方法，其中所述胚胎干细胞为原初细胞。

9.权利要求1的方法，其中通过调节细胞信号转导和/或细胞中一种或多种基因的表达使胚胎干细胞分化为第二种细胞类型。

10.权利要求9的方法，其中细胞中的基因表达调节包括将所述一种或多种基因转染入所述细胞中，或者其中基因表达的调节包括外源给予基因产物。

11.权利要求1的方法，其中细胞的分化通过观测细胞表型或通过检测细胞中一种或多种基因表达的调节来监测，由此确定所述细胞的分化状态。

12.权利要求11的方法，其中观测一种或多种报告基因的表达调节，其中所述报告基因对应于所述细胞的一种或多种分化状态。

13.权利要求11或权利要求12的方法，其中所述一种或多种基因编码标记。

14.权利要求13的方法，其中所述标记可通过免疫测定检测。

15.权利要求1的方法，其中所述细胞的分化通过增殖能力的丧失来监测。

16.权利要求1的方法，其中所述潜在调节物包括有机小分子或无机小分子。

17.权利要求1的方法，其中所述潜在调节物包括天然或衍生化的糖、蛋白质、核酸或蛋白质-核酸。

18.权利要求17的方法，其中所述蛋白为肽或糖蛋白。

19.权利要求17的方法，其中所述蛋白为多肽。

20.权利要求17的方法，其中所述核酸为DNA或RNA。

21.权利要求17的方法，其中所述核酸为寡核苷酸。

22.权利要求1的方法，其中所述潜在调节物得自具有药物样特性的小分子文库。

23.一种用于鉴定细胞信号转导途径的抑制剂或者促进剂的调节物的方法，所述方法包括使用祖细胞，所述方法包括通过使不是得自人胚胎或胎儿的胚胎干细胞序贯暴露于两种或更多种培养条件从而由胚胎干细胞获得所述祖细胞，其中所述培养条件是指掺入培养基中并影响生长和/或分化的特定物质，其中所述胚胎干细胞能够经由所述祖细胞分化为第二种细胞类型，其中所述祖细胞与体内的祖细胞群细胞基本相同。

24.权利要求23的方法，其中所述调节物为再生药物。

25.与体内的祖细胞群细胞基本相同的祖细胞在药物筛选测定中用于鉴定细胞信号转导途径的抑制剂或促进剂的调节物的用途，其中通过使不是得自人胚胎或胎儿的胚胎干细胞序贯暴露于两种或更多种培养条件从而由胚胎干细胞获得所述祖细胞，其中所述培养条件是指掺入培养基中并影响生长和/或分化的特定物质，其中所述胚胎干细胞能够经由所述祖细胞分化为第二种细胞类型。

26.权利要求25的用途，其中所述调节物为再生药物。